Gå direkte til indholdet
Chang-lever (HeLa)-celler
Væv
Lever
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Dokumenter

Chang-lever (HeLa)-celler

Cell line · Varenummer 300139

Chang-levercellelinjen, som man oprindeligt antog stammede fra normalt humant levervæv, er blevet genklassificeret i væsentlig grad efter yderligere...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Chang Liver-cellelinjen, som man oprindeligt troede stammede fra normalt menneskeligt levervæv, har gennemgået en betydelig omklassificering efter avanceret genetisk profilering. STR PCR DNA-profileringsteknikker har vist, at Chang Liver-cellelinjen ikke kan skelnes fra HeLa-cellelinjen, hvilket tyder på, at den ikke stammer fra hepatocytceller, som man tidligere troede, men snarere bør betragtes som et HeLaderivat. Denne afsløring har vigtige konsekvenser for forskere, der bruger denne cellelinje, og understreger behovet for omhyggelig fortolkning af eksperimentelle resultater, der stammer fra brugen af den.

HeLa-celler, der oprindeligt blev taget fra Henrietta Lacks, en sort kvinde, i begyndelsen af 1950'erne, er kendt for deres robuste vækst og genetiske stabilitet in vitro, egenskaber, der sandsynligvis deles af Chang Liver-cellelinjen på grund af dens genetiske lighed. På denne baggrund er det nødvendigt, at undersøgelser, der anvender Chang Liver-cellelinjen i forskning relateret til leverfunktion eller -sygdomme, muligvis skal revurderes eller bekræftes med yderligere hepatocytspecifikke modeller. Fejlidentifikationen fremhæver også bredere problemer i celledyrkningspraksis, herunder krydskontaminering og forkert mærkning, hvilket understreger vigtigheden af regelmæssig autentificering af cellelinjer, der bruges i forskningsmiljøer.

Væv
Lever
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i syriske hamstere

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Chang-lever (HeLa) (Cytion-katalognummer 300139)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Udtryk og modtagelighed

Isoenzymer
G6PD, A
Vira
Testet MHV (musehepatitisvirus) negativ
Virusfølsomhed
Poliovirus 1, 2, 3, adenovirus 3, vesikulær stomatitis (Indiana)
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Keratin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil danne et sammenhængende lag på ca. 4 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
30 år