Células hepáticas de Chang (HeLa)

A linha celular Chang Liver, que inicialmente se pensava ser derivada de tecido hepático humano normal, foi objeto de uma reclassificação significativa na sequência de uma análise genética avançada. As técnicas de caraterização do ADN por PCR STR demonstraram que a linha celular Chang Liver é indistinguível da linha celular HeLa, sugerindo que não é derivada de células de hepatócitos, como se pensava anteriormente, mas que deve ser considerada um derivado de HeLa. Esta revelação tem implicações importantes para os investigadores que utilizam esta linha celular, enfatizando a necessidade de uma interpretação cuidadosa dos resultados experimentais derivados da sua utilização.

As células HeLa, originalmente retiradas de Henrietta Lacks, uma mulher negra, no início da década de 1950, são conhecidas pelo seu crescimento robusto e estabilidade genética in vitro, caraterísticas provavelmente partilhadas pela linha celular Chang Liver, dada a sua semelhança genética. Estes antecedentes obrigam a que os estudos que utilizam a linha celular Chang Liver na investigação relacionada com a função ou as doenças do fígado possam ter de ser reavaliados ou confirmados com modelos adicionais específicos de hepatócitos. A identificação incorrecta também realça questões mais amplas nas práticas de cultura de células, incluindo a contaminação cruzada e a rotulagem incorrecta, sublinhando a importância da autenticação regular das linhas celulares utilizadas em contextos de investigação.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia