Skip to content
เซลล์ตับของ Chang (HeLa)
Tissue
ตับ
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Documents

เซลล์ตับของ Chang (HeLa)

Cell line · Product number 300139

The Chang Liver cell line, originally believed to be derived from normal human liver tissue, has undergone significant reclassification following advanced...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ Chang Liver ซึ่งเดิมเชื่อว่ามีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อตับปกติของมนุษย์ ได้รับการจัดประเภทใหม่อย่างมีนัยสำคัญหลังจากการวิเคราะห์พันธุกรรมขั้นสูงเทคนิคการวิเคราะห์ดีเอ็นเอด้วย STR PCR ได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ไลน์ตับ Chang ไม่สามารถแยกความแตกต่างจากเซลล์ไลน์ HeLa ได้ ซึ่งบ่งชี้ว่าเซลล์ไลน์นี้ไม่ได้มาจากเซลล์ตับตามที่คิดไว้ก่อนหน้านี้ แต่ควรถูกพิจารณาว่าเป็นอนุพันธ์ของ HeLa การเปิดเผยนี้มีความสำคัญต่อผู้วิจัยที่ใช้เซลล์ไลน์นี้ โดยเน้นย้ำถึงความจำเป็นในการตีความผลการทดลองที่ได้จากการใช้เซลล์ไลน์นี้อย่างรอบคอบ

เซลล์ HeLa ซึ่งถูกนำมาจาก Henrietta Lacks หญิงผิวดำในช่วงต้นทศวรรษ 1950 เป็นที่รู้จักกันดีในเรื่องการเจริญเติบโตที่แข็งแรงและความเสถียรทางพันธุกรรมในหลอดทดลอง ซึ่งลักษณะเหล่านี้อาจถูกถ่ายทอดไปยังสายพันธุ์เซลล์ตับ Chang Liver เนื่องจากความคล้ายคลึงทางพันธุกรรม พื้นฐานนี้ทำให้การศึกษาที่ใช้สายพันธุ์เซลล์ตับ Chang Liver ในการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับหน้าที่ของตับหรือโรคตับอาจจำเป็นต้องได้รับการประเมินใหม่หรือยืนยันด้วยแบบจำลองเฉพาะเซลล์ตับเพิ่มเติมการระบุตัวตนผิดพลาดนี้ยังสะท้อนถึงปัญหาที่กว้างขึ้นในกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์ รวมถึงการปนเปื้อนข้ามและการติดฉลากผิด ซึ่งเน้นย้ำถึงความสำคัญของการตรวจสอบความถูกต้องของสายพันธุ์เซลล์ที่ใช้ในการวิจัยอย่างสม่ำเสมอ

Tissue
ตับ
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในแฮมสเตอร์ซีเรีย

04Identifiers

Citation
เซลล์ตับของ Chang (HeLa) (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300139)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
จี6พีดี, เอ
Viruses
ทดสอบแล้ว MHV (ไวรัสตับอักเสบในหนู) เป็นลบ
Virus susceptibility
โปลิโอไวรัส 1, 2, 3, อะดีโนไวรัส 3, โรคปากและเท้าเปื่อย (อินเดียนา)
Reverse transcriptase
เชิงลบ
Products
เคราติน

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม. จะให้ชั้นเซลล์ที่หนาแน่นสมบูรณ์ในเวลาประมาณ 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
30 ปี