Ga naar de inhoud
Chang Lever (HeLa) Cellen
Weefsel
Lever
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Documenten

Chang Lever (HeLa) Cellen

Cell line · Productnummer 300139

De Chang-levercellijn, waarvan aanvankelijk werd aangenomen dat deze afkomstig was van normaal menselijk leverweefsel, is na geavanceerd onderzoek ingrijpend geherclassificeerd...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De Chang Liver cellijn, waarvan oorspronkelijk werd aangenomen dat deze was afgeleid van normaal menselijk leverweefsel, heeft een significante herclassificatie ondergaan na geavanceerde genetische profilering. STR PCR DNA profiling technieken hebben aangetoond dat de Chang Liver cellijn niet te onderscheiden is van de HeLa cellijn, wat suggereert dat het niet is afgeleid van hepatocytencellen zoals eerder werd gedacht, maar eerder moet worden beschouwd als een HeLa derivaat. Deze onthulling heeft belangrijke implicaties voor onderzoekers die deze cellijn gebruiken en benadrukt de noodzaak van zorgvuldige interpretatie van experimentele resultaten die voortkomen uit het gebruik ervan.

HeLa cellen, oorspronkelijk afkomstig van Henrietta Lacks, een zwarte vrouw, in het begin van de jaren 1950, staan bekend om hun robuuste groei en genetische stabiliteit in vitro, eigenschappen die waarschijnlijk gedeeld worden door de Chang Liver cellijn gezien de genetische gelijkenis. Deze achtergrond maakt het noodzakelijk dat studies die gebruikmaken van de Chang Liver cellijn in onderzoek naar leverfunctie of leverziekten mogelijk opnieuw moeten worden geëvalueerd of bevestigd met aanvullende hepatocyt-specifieke modellen. De verkeerde identificatie benadrukt ook bredere problemen in celkweekpraktijken, waaronder kruisbesmetting en verkeerde etikettering, en onderstreept het belang van regelmatige verificatie van cellijnen die in onderzoeksomgevingen worden gebruikt.

Weefsel
Lever
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, bij Syrische hamsters

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Chang Lever (HeLa) (Cytion catalogusnummer 300139)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Expressie en vatbaarheid

Iso-enzymen
G6PD, A
Virussen
MHV (muizenhepatitisvirus) negatief getest
Gevoeligheid voor virussen
Poliovirus 1, 2, 3, adenovirus 3, vesiculaire stomatitis (Indiana)
Reverse transcriptase
Negatief
Producten
Keratine

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 zal in ongeveer 4 dagen een confluente laag opleveren.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
30 jaar