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Células de hígado Chang (HeLa)
Pañuelo de papel
Hígado
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

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Células de hígado Chang (HeLa)

Cell line · Número de producto 300139

La línea celular Chang Liver, que en un principio se creía que procedía de tejido hepático humano normal, ha sido objeto de una reclasificación significativa tras estudios avanzados...

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Personalización / Recomendaciones

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1

01Información general

Descripción

La línea celular Chang Liver, que en un principio se creía derivada de tejido hepático humano normal, ha sufrido una importante reclasificación tras la realización de perfiles genéticos avanzados. Las técnicas de perfilado de ADN por PCR de STR han demostrado que la línea celular Chang Liver es indistinguible de la línea celular HeLa, lo que sugiere que no se deriva de células de hepatocitos como se pensaba anteriormente, sino que debería considerarse un derivado de HeLa. Esta revelación tiene importantes implicaciones para los investigadores que utilizan esta línea celular, ya que subraya la necesidad de interpretar cuidadosamente los resultados experimentales derivados de su uso.

Las células HeLa, obtenidas originalmente de Henrietta Lacks, una mujer negra, a principios de la década de 1950, son conocidas por su robusto crecimiento y estabilidad genética in vitro, características que probablemente comparte la línea celular Chang Liver dada su similitud genética. Estos antecedentes obligan a reevaluar o confirmar con otros modelos específicos de hepatocitos los estudios que emplean la línea celular Chang Liver en investigaciones relacionadas con la función o las enfermedades hepáticas. La identificación errónea también pone de relieve problemas más generales en las prácticas de cultivo celular, como la contaminación cruzada y el etiquetado incorrecto, lo que subraya la importancia de la autenticación periódica de las líneas celulares utilizadas en entornos de investigación.

Pañuelo de papel
Hígado
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en hámsters sirios

04Identificadores

Referencia
Hígado Chang (HeLa) (número de catálogo Cytion 300139)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Expresión y susceptibilidad

Isoenzimas
G6PD, A
Virus
MHV (virus de la hepatitis de ratón) negativo
Susceptibilidad a los virus
Poliovirus 1, 2, 3, adenovirus 3, estomatitis vesicular (Indiana)
Transcriptasa inversa
Negativo
Productos
Queratina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 producirán una capa confluente en aproximadamente 4 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
30 años