Премини към съдържанието
Клетки от черен дроб на Чанг (HeLa)
Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Аденокарцином
Синоними
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Документи

Клетки от черен дроб на Чанг (HeLa)

Cell line · Номер на продукта 300139

Клетъчната линия „Чанг Ливър“, за която първоначално се смяташе, че произхожда от нормална човешка чернодробна тъкан, претърпя значителна прекласификация вследствие на задълбочени...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия Chang Liver, за която първоначално се е смятало, че произхожда от нормална човешка чернодробна тъкан, е претърпяла значителна промяна в класификацията след усъвършенствано генетично профилиране. Техниките за профилиране на ДНК чрез STR PCR показаха, че клетъчната линия Chang Liver не се различава от клетъчната линия HeLa, което предполага, че тя не е получена от хепатоцитни клетки, както се смяташе преди, а по-скоро трябва да се счита за производна на HeLa. Това разкритие има важни последици за изследователите, използващи тази клетъчна линия, като подчертава необходимостта от внимателно тълкуване на експерименталните резултати, получени при използването ѝ.

Клетките HeLa, първоначално взети от чернокожата Хенриета Лакс в началото на 50-те години на миналия век, са известни със своя стабилен растеж и генетична стабилност in vitro - характеристики, които вероятно се споделят от клетъчната линия Chang Liver, като се има предвид нейното генетично сходство. Този контекст налага изследванията, при които се използва клетъчната линия Chang Liver в изследвания, свързани с чернодробната функция или заболявания, да бъдат преоценени или потвърдени с допълнителни модели, специфични за хепатоцитите. Неправилната идентификация също така подчертава по-широки проблеми в практиките за клетъчни култури, включително кръстосано замърсяване и неправилно етикетиране, като подчертава важността на редовното удостоверяване на клетъчните линии, използвани в изследователските среди.

Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Аденокарцином
Синоними
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при сирийски хамстери

04Идентификатори

Източник
Черен дроб на Чанг (HeLa) (каталожен номер 300139 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0238

05Проява и предразположеност

Изоензими
G6PD, A
Вируси
Изследван MHV (миши хепатит вирус) отрицателен
Податливост към вируси
Полиовирус 1, 2, 3, аденовирус 3, везикуларен стоматит (Индиана)
Обратна транскриптаза
Отрицателен
Продукти
Кератин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2 ще дадат конфулентен слой за около 4 дни
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
30 години