C4-2

La lignée cellulaire C4-2 est un modèle de cancer de la prostate humain androgéno-dépendant dérivé de la lignée cellulaire parentale LNCaP. Elle a été établie grâce à un processus de sélection in vivo par étapes impliquant la co-injection de cellules LNCaP avec des cellules stromales osseuses humaines (cellules MS) dans des souris immunodéficientes castrées, ce qui a conduit à l'émergence de tumeurs insensibles aux androgènes. La sous-ligne C4-2 a été spécifiquement dérivée de la variante C4 après un passage supplémentaire dans des hôtes castrés, et elle conserve la capacité de croître et de former des tumeurs dans des conditions d'épuisement des androgènes sans avoir besoin d'un support stromal.

Les cellules C4-2 conservent la production d'antigène prostatique spécifique (PSA) et l'expression du récepteur des androgènes (AR), y compris la mutation ponctuelle AR T877A caractéristique héritée de la LNCaP, mais présentent une réactivité réduite aux androgènes par rapport à la lignée parentale. Alors que les cellules LNCaP ont besoin d'androgènes pour se développer, les cellules C4-2 prolifèrent dans des environnements dépourvus d'androgènes et continuent d'exprimer le PSA et les gènes régulés par l'AR, ce qui en fait un modèle robuste de cancer de la prostate résistant à la castration (CRPC). In vitro, les cellules C4-2 se développent plus rapidement que les cellules LNCaP dans des conditions de culture standard, et elles présentent également une meilleure tumorigénicité in vivo. Lorsqu'elles sont injectées par voie sous-cutanée à des souris immunodéprimées, les cellules C4-2 forment facilement des tumeurs, ce qui contraste avec le potentiel tumorigène plus lent ou moins constant des cellules LNCaP.

Le modèle C4-2 a été largement utilisé pour étudier les mécanismes de résistance à la thérapie de privation d'androgènes (ADT), le rôle du métabolisme intracrine des androgènes et les voies moléculaires qui sous-tendent la progression du CRPC. Il conserve l'expression de l'antigène membranaire spécifique de la prostate (PSMA), bien qu'à des niveaux inférieurs à ceux de la LNCaP, et présente des réponses uniques à la stimulation androgénique et aux thérapies antiandrogéniques. Ces caractéristiques font du C4-2 un modèle de référence pour l'évaluation de nouvelles thérapies ciblant le cancer avancé de la prostate.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie