C4-2

C4-2細胞株は、親株であるLNCaP細胞株から派生したアンドロゲン非依存性ヒト前立腺がんモデルである。この細胞株は、去勢した免疫不全マウスにLNCaP細胞とヒト骨間質細胞（MS細胞）を共注入する段階的in vivo選択過程を経て樹立され、アンドロゲン非依存性腫瘍の出現につながった。C4-2サブラインは、去勢宿主でさらに継代した後、C4変異体から特異的に誘導されたもので、間質支持を必要とせずにアンドロゲン欠乏条件下で増殖し腫瘍を形成する能力を保持している。

C4-2細胞は、LNCaPから受け継いだ特徴的なT877A AR点突然変異を含め、前立腺特異抗原（PSA）産生とアンドロゲン受容体（AR）の発現を維持しているが、親株と比較してアンドロゲン応答性は低下している。LNCaP細胞は増殖にアンドロゲンを必要とするが、C4-2細胞はアンドロゲン欠乏環境でも増殖し、PSAおよびAR制御遺伝子を発現し続けるので、去勢抵抗性前立腺癌（CRPC）の頑健なモデルとなる。in vitroでは、C4-2細胞は標準的な培養条件下でLNCaPよりも急速に増殖し、in vivoでも改善された腫瘍形成性を示す。免疫不全マウスに皮下注射すると、C4-2細胞は容易に腫瘍を形成する。この特徴は、LNCaP細胞の腫瘍形成能が遅いか、一貫性がないのとは対照的である。

C4-2モデルは、アンドロゲン除去療法（ADT）に対する抵抗性のメカニズム、内分泌アンドロゲン代謝の役割、およびCRPCの進行を支える分子経路を研究するために広く用いられてきた。LNCaPより低レベルではあるが、前立腺特異的膜抗原（PSMA）の発現を保持し、アンドロゲン刺激や抗アンドロゲン療法に対してユニークな反応を示す。これらの特性から、C4-2は進行前立腺癌を標的とする新しい治療法を評価するための基礎モデルとなる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。