C4-2

Celična linija C4-2 je od androgenov neodvisen model človeškega raka prostate, pridobljen iz starševske celične linije LNCaP. Vzpostavljena je bila s postopnim postopkom selekcije in vivo, ki vključuje sočasno injiciranje celic LNCaP s človeškimi kostnimi stromalnimi celicami (MS celicami) v kastrirane imunodeficientne miši, kar je privedlo do nastanka tumorjev, neobčutljivih na androgene. Podlinija C4-2 je bila posebej izpeljana iz različice C4 po nadaljnji pasažiranju v kastriranih gostiteljih in ohranja sposobnost rasti in oblikovanja tumorjev v pogojih z zmanjšanim številom androgenov brez potrebe po stromalni podpori.

Celice C4-2 ohranijo proizvodnjo prostatičnega specifičnega antigena (PSA) in izražanje androgenega receptorja (AR), vključno z značilno točkovno mutacijo T877A AR, podedovano od LNCaP, vendar v primerjavi s starševsko linijo kažejo manjšo odzivnost na androgene. Medtem ko celice LNCaP za rast potrebujejo androgene, se celice C4-2 razmnožujejo v okoljih z zmanjšano vsebnostjo androgenov ter še naprej izražajo PSA in gene, ki jih uravnava AR, zato so zanesljiv model kastracijsko odpornega raka prostate (CRPC). In vitro celice C4-2 rastejo hitreje kot LNCaP v standardnih pogojih gojenja in tudi in vivo so bolj tumorigene. Ob podkožnem vbrizgavanju v imunsko oslabljene miši celice C4-2 zlahka tvorijo tumorje, kar je v nasprotju s počasnejšim ali manj doslednim tumorogenim potencialom celic LNCaP.

Model C4-2 se pogosto uporablja za proučevanje mehanizmov odpornosti na terapijo z odvzemom androgenov (ADT), vloge intrakrinega metabolizma androgenov in molekularnih poti, ki so podlaga za napredovanje CRPC. Ohranja izražanje membranskega antigena, specifičnega za prostato (PSMA), čeprav na nižji ravni kot LNCaP, in kaže edinstvene odzive na androgeno stimulacijo in antiandrogenske terapije. Zaradi teh lastnosti je C4-2 temeljni model za ocenjevanje novih terapevtskih sredstev za napredovalega raka prostate.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo