C4-2

La linea cellulare C4-2 è un modello di cancro alla prostata umano indipendente dagli androgeni, derivato dalla linea cellulare parentale LNCaP. È stata creata attraverso un processo di selezione in vivo a tappe che prevedeva la co-iniezione di cellule LNCaP con cellule stromali ossee umane (cellule MS) in topi immunodeficienti castrati, portando alla comparsa di tumori insensibili agli androgeni. La sublinea C4-2 è stata derivata specificamente dalla variante C4 dopo un ulteriore passaggio in ospiti castrati, e mantiene la capacità di crescere e formare tumori in condizioni di deprivazione di androgeni senza la necessità di un supporto stromale.

Le cellule C4-2 mantengono la produzione di antigene prostatico specifico (PSA) e l'espressione del recettore degli androgeni (AR), compresa la caratteristica mutazione puntiforme T877A AR ereditata da LNCaP, ma mostrano una ridotta reattività agli androgeni rispetto alla linea parentale. Mentre le cellule LNCaP necessitano di androgeni per la crescita, le cellule C4-2 proliferano in ambienti privi di androgeni e continuano a esprimere il PSA e i geni regolati dall'AR, diventando così un modello robusto per il cancro alla prostata resistente alla castrazione (CRPC). In vitro, le cellule C4-2 crescono più rapidamente delle LNCaP in condizioni di coltura standard e mostrano anche una migliore tumorigenicità in vivo. Quando vengono iniettate per via sottocutanea in topi immunocompromessi, le cellule C4-2 formano prontamente tumori, una caratteristica che contrasta con il potenziale tumorigenico più lento o meno consistente delle cellule LNCaP.

Il modello C4-2 è stato ampiamente utilizzato per studiare i meccanismi di resistenza alla terapia di deprivazione androgenica (ADT), il ruolo del metabolismo androgenico intracrino e le vie molecolari alla base della progressione della CRPC. Mantiene l'espressione dell'antigene di membrana prostatico specifico (PSMA), anche se a livelli inferiori rispetto a LNCaP, e mostra risposte uniche alla stimolazione androgenica e alle terapie antiandrogeniche. Queste caratteristiche rendono il C4-2 un modello fondamentale per la valutazione di nuove terapie mirate al carcinoma prostatico avanzato.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia