C4-2

C4-2-cellelinjen er en androgenuavhengig modell for human prostatakreft som er avledet fra den overordnede LNCaP-cellelinjen. Den ble etablert gjennom en trinnvis in vivo seleksjonsprosess som involverte koinjeksjon av LNCaP-celler med humane benstromaceller (MS-celler) i kastrerte mus med immunsvikt, noe som førte til fremveksten av androgenufølsomme svulster. C4-2-sublinjen ble spesifikt avledet fra C4-varianten etter ytterligere passering i kastrerte verter, og den beholder evnen til å vokse og danne svulster under androgenfattige forhold uten behov for stromal støtte.

C4-2-celler opprettholder produksjonen av prostataspesifikt antigen (PSA) og uttrykket av androgenreseptoren (AR), inkludert den karakteristiske T877A AR-punktmutasjonen som er arvet fra LNCaP, men viser redusert androgenresponsivitet sammenlignet med foreldrelinjen. Mens LNCaP-celler trenger androgener for å vokse, formerer C4-2-celler seg i androgenfattige miljøer og fortsetter å uttrykke PSA og AR-regulerte gener, noe som gjør dem til en robust modell for kastrasjonsresistent prostatakreft (CRPC). In vitro vokser C4-2-celler raskere enn LNCaP under standard dyrkingsbetingelser, og de viser også bedre tumorigenisitet in vivo. Når C4-2-celler injiseres subkutant i immunkompromitterte mus, danner de lett svulster, noe som står i kontrast til LNCaP-cellenes langsommere eller mindre konsekvente tumorgenetiske potensial.

C4-2-modellen har vært mye brukt til å studere mekanismer for resistens mot androgen deprivasjonsterapi (ADT), rollen til intrakrin androgenmetabolisme og de molekylære veiene som ligger til grunn for progresjon av CRPC. C4-2 beholder uttrykket av prostataspesifikt membranantigen (PSMA), selv om det er på lavere nivåer enn i LNCaP, og viser unike responser på androgenstimulering og antiandrogenbehandlinger. Disse egenskapene gjør C4-2 til en hjørnesteinsmodell for evaluering av nye behandlingsformer rettet mot avansert prostatakreft.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring