C4-2

إن خط الخلايا C4-2 هو نموذج لسرطان البروستاتا البشري المستقل عن الأندروجين مشتق من خط الخلايا LNCaP الأبوي. وقد تم إنشاؤه من خلال عملية انتقاء متدرجة في الجسم الحي تتضمن الحقن المشترك لخلايا LNCaP مع خلايا لحمية عظمية بشرية (خلايا MS) في فئران مخصية تعاني من نقص المناعة، مما أدى إلى ظهور أورام غير حساسة للأندروجين. وقد تم اشتقاق السلالة الفرعية C4-2 تحديدًا من المتغير C4 بعد مرورها في مضيفين مخصيين، وهي تحتفظ بالقدرة على النمو وتشكيل الأورام في ظروف استنفاد الأندروجين دون الحاجة إلى دعم اللحمية.

تحافظ خلايا C4-2 على إنتاج المستضد الخاص بالبروستاتا (PSA) والتعبير عن مستقبلات الأندروجين (AR)، بما في ذلك الطفرة النقطية T877A AR المميزة الموروثة من LNCaP، ولكنها تُظهر استجابة منخفضة للأندروجين مقارنةً بالخط الأبوي. وفي حين أن خلايا LNCaP تتطلب الأندروجينات للنمو، فإن خلايا C4-2 تتكاثر في البيئات المنزوعة الأندروجين وتستمر في التعبير عن مستقبلات البروستاتا المستضد البروستاتا وجينات AR المنظمة، مما يجعلها نموذجًا قويًا لسرطان البروستاتا المقاوم للإخصاء (CRPC). في المختبر، تنمو خلايا C4-2 بسرعة أكبر من LNCaP في ظل ظروف الاستنبات القياسية، كما أنها تُظهر أيضًا قدرة محسنة على التكاثر الورمي في الجسم الحي. عند حقن خلايا C4-2 تحت الجلد في الفئران المنقوصة المناعة، تشكل خلايا C4-2 أورامًا بسهولة، وهي ميزة تتناقض مع القدرة الأبطأ أو الأقل اتساقًا في توليد الأورام لخلايا LNCaP.

وقد استُخدم نموذج C4-2 على نطاق واسع لدراسة آليات مقاومة العلاج بالحرمان من الأندروجين (ADT)، ودور استقلاب الأندروجين داخل الأدرينين، والمسارات الجزيئية التي تدعم تطور البروستاتا CRPC. يحتفظ بالتعبير عن مستضد الغشاء الخاص بالبروستاتا (PSMA)، على الرغم من أنه بمستويات أقل من LNCaP، ويظهر استجابات فريدة لتحفيز الأندروجين والعلاجات المضادة للأندروجين. هذه السمات تجعل من C4-2 نموذجًا أساسيًا لتقييم العلاجات الجديدة التي تستهدف سرطان البروستاتا المتقدم.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان