Премини към съдържанието
C4-2
Тъкан
Метастатичен
Заболяване
Карцином на простатата
Синоними
LNCaP-C4-2, LNCaP subline C4-2, C4-2, C42, Sp 2817

Документи

C4-2

Cell line · Номер на продукта 305752

The C4-2 cell line is an androgen-independent human prostate cancer model derived from the parental LNCaP cell line. It was established through a stepwise...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия C4-2 е андрогенно-независим модел на човешки рак на простатата, получен от родителската клетъчна линия LNCaP. Тя е създадена чрез поетапен процес на селекция in vivo, включващ съвместно инжектиране на LNCaP клетки с човешки костни стромални клетки (MS клетки) в кастрирани имунодефицитни мишки, което води до появата на андроген-чувствителни тумори. Подлинията C4-2 е специално получена от варианта C4 след по-нататъшно преминаване в кастрирани гостоприемници и запазва способността си да расте и да образува тумори в условия на андрогенна недостатъчност без необходимост от стромална подкрепа.

Клетките C4-2 запазват производството на простатноспецифичен антиген (PSA) и експресията на андрогенния рецептор (AR), включително характерната точкова мутация T877A AR, наследена от LNCaP, но показват намалена андрогенна реактивност в сравнение с родителската линия. Докато LNCaP клетките изискват андрогени за растежа си, C4-2 клетките се размножават в среда, лишена от андрогени, и продължават да експресират PSA и AR-регулирани гени, което ги прави надежден модел за кастрационно резистентен рак на простатата (CRPC). In vitro клетките C4-2 растат по-бързо от LNCaP при стандартни условия на култивиране, а също така проявяват по-добра туморогенност in vivo. Когато се инжектират подкожно в имунокомпрометирани мишки, C4-2 клетките лесно образуват тумори - характеристика, която контрастира с по-бавния или по-малко последователен туморогенен потенциал на LNCaP клетките.

Моделът C4-2 е широко използван за изучаване на механизмите на резистентност към андроген-депривационна терапия (ADT), ролята на интракринния андрогенен метаболизъм и молекулярните пътища, които са в основата на прогресията на CRPC. Той запазва експресията на специфичния за простатата мембранен антиген (PSMA), макар и на по-ниски нива от LNCaP, и показва уникални отговори на андрогенна стимулация и антиандрогенни терапии. Тези характеристики превръщат C4-2 в основополагащ модел за оценка на нови терапии, насочени към напредналия рак на простатата.

Тъкан
Метастатичен
Заболяване
Карцином на простатата
Синоними
  • LNCaP-C4-2
  • LNCaP subline C4-2
  • C4-2
  • C42
  • Sp 2817

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
C4-2 (каталожен номер 305752 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_4782

05Проява и предразположеност

Мутационен профил
Мутация: Thr878Ala (c.2632A>G), хемизиготна. Мутация: MEN1, проста, p.Tyr318Ter (c.954T>G) (p.Tyr313Ter, c.939T>A), хетерозиготна (от родителска клетъчна линия).Мутация: PIK3R1, проста, p.Arg639Ter (c.1915C>T), хетерозиготна (от родителска клетъчна линия). мутация, PTEN, проста, p.Lys6Argfs*4 (c.17_18delAA), неуточнена (от родителска клетъчна линия).

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Hams F12 (4:1)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Добавете към средата 10% hia FBS
Плътност на засяването
2 - 3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
50 години
Етническа принадлежност
Кавказки