C4-2

Linia komórkowa C4-2 jest niezależnym od androgenów modelem ludzkiego raka prostaty pochodzącym z macierzystej linii komórkowej LNCaP. Powstała ona w wyniku stopniowego procesu selekcji in vivo obejmującego jednoczesne wstrzykiwanie komórek LNCaP z ludzkimi komórkami zrębu kości (komórkami MS) wykastrowanym myszom z niedoborem odporności, co doprowadziło do pojawienia się guzów niewrażliwych na androgeny. Podlinia C4-2 została wyprowadzona z wariantu C4 po dalszym pasażowaniu w wykastrowanych gospodarzach i zachowuje zdolność do wzrostu i tworzenia guzów w warunkach pozbawionych androgenów bez potrzeby wsparcia zrębu.

Komórki C4-2 utrzymują produkcję antygenu specyficznego dla prostaty (PSA) i ekspresję receptora androgenowego (AR), w tym charakterystyczną mutację punktową T877A AR odziedziczoną po LNCaP, ale wykazują zmniejszoną wrażliwość na androgeny w porównaniu z linią rodzicielską. Podczas gdy komórki LNCaP wymagają androgenów do wzrostu, komórki C4-2 proliferują w środowiskach pozbawionych androgenów i nadal wyrażają PSA i geny regulowane przez AR, co czyni je solidnym modelem raka prostaty opornego na kastrację (CRPC). In vitro, komórki C4-2 rosną szybciej niż LNCaP w standardowych warunkach hodowlanych, a także wykazują lepszą aktywność nowotworową in vivo. Po wstrzyknięciu podskórnym myszom z obniżoną odpornością, komórki C4-2 łatwo tworzą guzy, co kontrastuje z wolniejszym lub mniej spójnym potencjałem nowotworowym komórek LNCaP.

Model C4-2 był szeroko stosowany do badania mechanizmów oporności na terapię pozbawienia androgenów (ADT), roli wewnątrzwydzielniczego metabolizmu androgenów oraz szlaków molekularnych leżących u podstaw progresji CRPC. Zachowuje ekspresję antygenu błonowego specyficznego dla prostaty (PSMA), choć na niższych poziomach niż LNCaP, i wykazuje unikalne odpowiedzi na stymulację androgenową i terapie antyandrogenowe. Te cechy sprawiają, że C4-2 jest kluczowym modelem do oceny nowych terapii ukierunkowanych na zaawansowanego raka prostaty.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym