C4-2

Buněčná linie C4-2 je model lidského karcinomu prostaty nezávislý na androgenech, odvozený od rodičovské buněčné linie LNCaP. Byla vytvořena postupnou selekcí in vivo, která zahrnovala společnou injekci buněk LNCaP s lidskými kostními stromálními buňkami (MS buňkami) do kastrovaných imunodeficitních myší, což vedlo ke vzniku androgen-necitlivých nádorů. Podlinie C4-2 byla specificky odvozena z varianty C4 po další pasáži v kastrovaných hostitelích a zachovává si schopnost růst a vytvářet nádory v podmínkách s nedostatkem androgenů bez potřeby stromální podpory.

Buňky C4-2 si zachovávají produkci prostatického specifického antigenu (PSA) a expresi androgenního receptoru (AR), včetně charakteristické bodové mutace T877A AR zděděné z LNCaP, ale ve srovnání s rodičovskou linií vykazují sníženou reaktivitu na androgen. Zatímco buňky LNCaP vyžadují ke svému růstu androgeny, buňky C4-2 se množí i v prostředí s nedostatkem androgenů a nadále exprimují PSA a geny regulované AR, což z nich činí robustní model pro kastračně rezistentní karcinom prostaty (CRPC). In vitro rostou buňky C4-2 za standardních kultivačních podmínek rychleji než buňky LNCaP a vykazují také lepší nádorovou aktivitu in vivo. Při subkutánní injekci do imunokompromitovaných myší buňky C4-2 snadno vytvářejí nádory, což je v kontrastu s pomalejším nebo méně konzistentním tumorigenním potenciálem buněk LNCaP.

Model C4-2 byl široce používán ke studiu mechanismů rezistence vůči androgenní deprivační terapii (ADT), role intrakrinního metabolismu androgenů a molekulárních drah, které jsou základem progrese CRPC. Zachovává si expresi prostatického specifického membránového antigenu (PSMA), i když v nižších hladinách než LNCaP, a vykazuje jedinečné reakce na androgenní stimulaci a antiandrogenní terapii. Díky těmto vlastnostem je C4-2 základním modelem pro hodnocení nových terapeutik zaměřených na pokročilý karcinom prostaty.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení