C4-2

C4-2 rakuliin on androgeenist sõltumatu inimese eesnäärmevähi mudel, mis on saadud LNCaP vanemrakuliinist. See loodi järkjärgulise in vivo selektsiooniprotsessi abil, mis hõlmas LNCaP rakkude ja inimese luustroomi rakkude (MS-rakkude) koosinjektsiooni kastreeritud immuunpuudulikkusega hiirtele, mis viis androgeenitundlike kasvajate tekkimiseni. C4-2 alamliin saadi spetsiifiliselt C4-variandist pärast edasist passageerimist kastreeritud peremeestes ning see säilitab võime kasvada ja moodustada kasvajaid androgeenivaesetes tingimustes ilma stroomi toetuseta.

C4-2 rakud säilitavad eesnäärme-spetsiifilise antigeeni (PSA) tootmise ja androgeeni retseptori (AR) ekspressiooni, sealhulgas LNCaP-lt päritud iseloomulikku T877A AR punktmutatsiooni, kuid näitavad vähenenud androgeenivastust võrreldes vanemliiniga. Kui LNCaP rakud vajavad kasvuks androgeene, siis C4-2 rakud paljunevad androgeenivabas keskkonnas ja ekspresseerivad jätkuvalt PSA ja AR-reguleeritud geene, mis teeb neist tugeva mudeli kastratsiooniresistentse eesnäärmevähi (CRPC) jaoks. In vitro kasvavad C4-2 rakud kiiremini kui LNCaP standardkultuuritingimustes ja neil on ka parem kasvajate teke in vivo. Kui C4-2 rakud süstitakse nahaaluse süstimise teel immuunpuudulikkusega hiirtele, moodustavad nad kergesti kasvajaid, mis on vastuolus LNCaP rakkude aeglasema või vähem järjepideva kasvajapotentsiaaliga.

C4-2 mudelit on laialdaselt kasutatud androgeenide deprivatsiooniteraapia (ADT) suhtes resistentsuse mehhanismide, intrakriinsete androgeenide metabolismi rolli ja CRPC progresseerumist toetavate molekulaarsete radade uurimiseks. Mudelis säilib eesnäärme-spetsiifilise membraani antigeeni (PSMA) ekspressioon, kuigi madalamal tasemel kui LNCaP, ning see reageerib ainulaadselt androgeenide stimuleerimisele ja antiandrogeenravile. Need omadused muudavad C4-2 mudeli nurgakiviks uute, kaugelearenenud eesnäärmevähile suunatud ravimeetodite hindamisel.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest