C4-2

De C4-2 cellijn is een androgeenonafhankelijk humaan prostaatkankermodel afgeleid van de ouderlijke LNCaP cellijn. De lijn werd gecreëerd door een stapsgewijs in vivo selectieproces waarbij LNCaP-cellen samen met menselijke botstromale cellen (MS-cellen) werden geïnjecteerd in gecastreerde immuundeficiënte muizen, wat leidde tot het ontstaan van androgeenongevoelige tumoren. De C4-2-sublijn werd specifiek afgeleid van de C4-variant na verdere passage in gecastreerde gastheren, en deze behoudt het vermogen om te groeien en tumoren te vormen in androgeenarme omstandigheden zonder de noodzaak van stromale ondersteuning.

C4-2 cellen behouden de productie van prostaat-specifiek antigeen (PSA) en expressie van de androgeenreceptor (AR), inclusief de karakteristieke T877A AR puntmutatie geërfd van LNCaP, maar vertonen een verminderde androgeenresponsiviteit vergeleken met de ouderlijn. Terwijl LNCaP-cellen androgenen nodig hebben om te groeien, prolifereren C4-2 cellen in een omgeving zonder androgenen en blijven ze PSA en AR-gereguleerde genen tot expressie brengen, waardoor ze een robuust model vormen voor castratieresistente prostaatkanker (CRPC). In vitro groeien C4-2 cellen sneller dan LNCaP onder standaard kweekomstandigheden en ze vertonen ook een verbeterde tumorigeniciteit in vivo. Bij subcutane injectie in immuungecompromitteerde muizen vormen C4-2 cellen gemakkelijk tumoren, een kenmerk dat contrasteert met het langzamere of minder consistente tumorigene potentieel van LNCaP cellen.

Het C4-2 model is veel gebruikt voor het bestuderen van mechanismen van resistentie tegen androgeendeprivatietherapie (ADT), de rol van intracrien androgeenmetabolisme en de moleculaire routes die ten grondslag liggen aan de progressie van CRPC. Het behoudt expressie van prostaat-specifiek membraanantigeen (PSMA), hoewel op lagere niveaus dan LNCaP, en vertoont unieke reacties op androgeenstimulatie en anti-androgeentherapieën. Deze eigenschappen maken C4-2 tot een hoeksteenmodel voor het evalueren van nieuwe therapeutica voor gevorderde prostaatkanker.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring