C4-2

C4-2-solulinja on androgeeniriippumaton ihmisen eturauhassyöpämalli, joka on johdettu LNCaP-solulinjasta. Se perustettiin vaiheittaisella in vivo -valintaprosessilla, jossa LNCaP-soluja ja ihmisen luustromosoluja (MS-soluja) ruiskutettiin yhdessä kastroiduille immuunipuutteisille hiirille, mikä johti androgeeni-sensitiivisten kasvainten syntyyn. C4-2-alalinja johdettiin nimenomaan C4-variantista sen jälkeen, kun se oli edelleen kulkeutunut kastroiduissa isännissä, ja sillä on edelleen kyky kasvaa ja muodostaa kasvaimia androgeenivajeisissa olosuhteissa ilman stroomatukea.

C4-2-solut säilyttävät eturauhaspesifisen antigeenin (PSA) tuotannon ja androgeenireseptorin (AR) ilmentymisen, mukaan lukien LNCaP:stä periytyvä tyypillinen T877A AR-pistemutaatio, mutta niillä on heikentynyt androgeenireagoivuus verrattuna emolinjaan. Vaikka LNCaP-solut tarvitsevat androgeeneja kasvuunsa, C4-2-solut lisääntyvät androgeenivapaassa ympäristössä ja ilmentävät edelleen PSA:ta ja AR:n säätelemiä geenejä, mikä tekee niistä vankan mallin kastraatioresistentille eturauhassyövälle (CRPC). In vitro C4-2-solut kasvavat nopeammin kuin LNCaP-solut tavanomaisissa viljelyolosuhteissa, ja ne ovat myös in vivo kasvainvaikuttavuudeltaan parempia. Kun C4-2-solut ruiskutetaan ihon alle immuunipuutteisiin hiiriin, ne muodostavat helposti kasvaimia, mikä on ristiriidassa LNCaP-solujen hitaamman tai vähemmän johdonmukaisen kasvainpotentiaalin kanssa.

C4-2-mallia on käytetty laajalti androgeeninpoistohoidon (ADT) resistenssimekanismien, intrakriinisen androgeenimetabolian roolin ja CRPC:n etenemistä tukevien molekyylireittien tutkimiseen. Malli säilyttää eturauhaspesifisen kalvoantigeenin (PSMA) ilmentymisen, vaikkakin alhaisemmalla tasolla kuin LNCaP, ja siinä on ainutlaatuisia vasteita androgeenistimulaatiolle ja antiandrogeenihoidoille. Nämä ominaisuudet tekevät C4-2:sta kulmakivimallin eturauhassyövän pitkälle edenneeseen vaiheeseen kohdistuvien uusien terapioiden arvioinnissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa