C4-2

A C4-2 sejtvonal egy androgén-független humán prosztatarák modell, amely a szülői LNCaP sejtvonalból származik. Lépcsőzetes in vivo szelekciós eljárással hozták létre, amelynek során az LNCaP sejteket humán csontstroma sejtekkel (MS sejtek) együtt injektálták kasztrált immunhiányos egerekbe, ami androgén-érzékeny tumorok kialakulásához vezetett. A C4-2 alvonal specifikusan a C4 variánsból származik, kasztrált gazdaszervezetekben történő további passzázs után, és megőrzi azt a képességét, hogy androgénhiányos körülmények között is képes növekedni és tumorokat képezni, stromális támogatás nélkül.

A C4-2 sejtek fenntartják a prosztata-specifikus antigén (PSA) termelést és az androgénreceptor (AR) expresszióját, beleértve az LNCaP-től örökölt jellegzetes T877A AR pontmutációt, de a szülői vonalhoz képest csökkent androgénrezisztenciát mutatnak. Míg az LNCaP sejteknek a növekedéshez androgénekre van szükségük, a C4-2 sejtek androgénhiányos környezetben is proliferálnak, és továbbra is expresszálják a PSA-t és az AR által szabályozott géneket, ami a kasztrációnak ellenálló prosztatarák (CRPC) robusztus modelljévé teszi őket. In vitro a C4-2 sejtek gyorsabban növekednek, mint az LNCaP sejtek standard tenyésztési körülmények között, és in vivo is jobb tumorigenitást mutatnak. Immunhiányos egerekbe szubkután befecskendezve a C4-2 sejtek könnyen képeznek tumorokat, ami ellentétben áll az LNCaP sejtek lassabb vagy kevésbé következetes tumorigén potenciáljával.

A C4-2 modellt széles körben használták az androgénmegvonó terápiával (ADT) szembeni rezisztencia mechanizmusainak, az intrakrin androgén metabolizmus szerepének és a CRPC progresszióját alátámasztó molekuláris útvonalak tanulmányozására. Megtartja a prosztata-specifikus membránantigén (PSMA) expresszióját, bár alacsonyabb szinten, mint az LNCaP, és egyedi válaszokat mutat az androgénstimulációra és az antiandrogén terápiákra. Ezek a tulajdonságok teszik a C4-2-t az előrehaladott prosztatarákot célzó új terápiák értékelésének alapmodelljévé.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban