İçeriğe atla
C4-2
Doku
Metastatik
Hastalık
Prostat karsinomu
Eş anlamlılar
LNCaP-C4-2, LNCaP subline C4-2, C4-2, C42, Sp 2817

C4-2

Cell line · Ürün numarası 305752

The C4-2 cell line is an androgen-independent human prostate cancer model derived from the parental LNCaP cell line. It was established through a stepwise...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

C4-2 hücre hattı, ebeveyn LNCaP hücre hattından türetilen androjenden bağımsız bir insan prostat kanseri modelidir. LNCaP hücrelerinin insan kemik stromal hücreleri (MS hücreleri) ile birlikte hadım edilmiş immün yetmezlikli farelere enjekte edilmesini içeren ve androjene duyarsız tümörlerin ortaya çıkmasına yol açan aşamalı bir in vivo seleksiyon süreci ile oluşturulmuştur. C4-2 alt hattı, hadım edilmiş konakçılarda daha fazla pasajdan sonra özellikle C4 varyantından türetilmiştir ve stromal desteğe ihtiyaç duymadan androjenden arındırılmış koşullarda büyüme ve tümör oluşturma yeteneğini korumaktadır.

C4-2 hücreleri, LNCaP'den miras alınan karakteristik T877A AR nokta mutasyonu da dahil olmak üzere prostat spesifik antijen (PSA) üretimini ve androjen reseptörünün (AR) ekspresyonunu sürdürür, ancak ebeveyn hattına kıyasla azalmış androjen duyarlılığı sergiler. LNCaP hücreleri büyüme için androjenlere ihtiyaç duyarken, C4-2 hücreleri androjenden arındırılmış ortamlarda çoğalır ve PSA ve AR ile düzenlenen genleri ifade etmeye devam ederek onları kastrasyona dirençli prostat kanseri (CRPC) için sağlam bir model haline getirir. İn vitro olarak, C4-2 hücreleri standart kültür koşulları altında LNCaP'den daha hızlı büyür ve ayrıca in vivo olarak gelişmiş tümörijenisite sergilerler. Bağışıklık sistemi baskılanmış farelere deri altından enjekte edildiğinde, C4-2 hücreleri kolayca tümör oluşturur; bu özellik LNCaP hücrelerinin daha yavaş veya daha az tutarlı tümörijenik potansiyeli ile tezat oluşturur.

C4-2 modeli, androjen yoksunluğu tedavisine (ADT) direnç mekanizmalarını, intrakrin androjen metabolizmasının rolünü ve CRPC ilerlemesinin altında yatan moleküler yolları incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. LNCaP'den daha düşük seviyelerde olmasına rağmen prostat spesifik membran antijeni (PSMA) ekspresyonunu korur ve androjen stimülasyonu ve antiandrojen tedavilerine benzersiz yanıtlar gösterir. Bu özellikler, C4-2'yi ileri prostat kanserini hedefleyen yeni terapötiklerin değerlendirilmesinde bir köşe taşı modeli haline getirmektedir.

Doku
Metastatik
Hastalık
Prostat karsinomu
Eş anlamlılar
  • LNCaP-C4-2
  • LNCaP subline C4-2
  • C4-2
  • C42
  • Sp 2817

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
C4-2 (Cytion katalog numarası 305752)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_4782

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: AR, Basit, p.Thr878Ala (c.2632A>G), Hemizigot. Mutasyon, MEN1, Basit, p.Tyr318Ter (c.954T>G) (p.Tyr313Ter, c.939T>A), Heterozigot (ebeveyn hücre hattından) Mutasyon, PIK3R1, Basit, p.Arg639Ter (c.1915Mutasyon, PTEN, Basit, p.Lys6Argfs*4 (c.17_18delAA), Belirtilmemiş (ana hücre hattından).

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Hams F12 (4:1)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Besiyerine %10 hia FBS ekleyin
Ekim yoğunluğu
2 - 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
50 yıl
Etnik köken
Kafkas