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CFPAC-1
Tissu
Pancréas
Maladie
Mucoviscidose, Adénocarcinome canalaire pancréatique
Site métastatique
Foie
Synonymes
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

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CFPAC-1

Cell line · Référence du produit 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules CFPAC-1, dérivées d'un homme de 26 ans atteint de fibrose kystique et de métastases hépatiques d'un adénocarcinome canalaire, sont une lignée cellulaire hyperdiploïde présentant des caractéristiques remarquables pour la recherche biologique. Leur propriété de croissance par adhérence et leur capacité tumorigène chez la souris nude en font un modèle pratique pour les études in vitro sur le cancer. Le caryotype de la lignée cellulaire comprend un nombre modal de 73 chromosomes avec plusieurs translocations et, surtout, deux à trois copies du chromosome 7, où se trouve le gène de la mucoviscidose.

Ces cellules expriment des antigènes et des gènes liés au cancer comme le CA19-9, l'antigène carcino-embryonnaire (CEA), l'antigène pancréatique oncofœtal (POA), l'antigène associé à l'adénocarcinome (ACAA) et les kératines épithéliales, ce qui permet de mieux comprendre la biologie du cancer. En ce qui concerne la pathologie de la mucoviscidose, les cellules CFPAC-1 présentent des activités de transport d'ions uniques. Elles ne répondent pas aux agonistes de l'AMPc, aux stimulateurs de l'adényl-cyclase ou aux inhibiteurs de la phosphodiestérase pour le flux d'ions chlorure, mais présentent un efflux de chlorure accru en réponse aux ionophores calciques.

Les cellules CFPAC-1 sont porteuses de la mutation commune de la mucoviscidose - délétion de trois nucléotides conduisant à l'absence de phénylalanine en position 508 dans le gène CFTR. Morphologiquement, elles présentent des caractéristiques épithéliales avec des microvillosités apicales, des jonctions serrées et des jonctions lacunaires, pertinentes pour l'étude des interactions entre les tissus épithéliaux dans le cancer et la mucoviscidose.

Tissu
Pancréas
Maladie
Mucoviscidose, Adénocarcinome canalaire pancréatique
Site métastatique
Foie
Synonymes
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale
Tumorigène
Oui

04Identifiants

Référence
CFPAC-1 (numéro de catalogue 305066 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Antigène carcinoembryonnaire (Cea), 9Ng/Ml, Antigène oncofœtal pancréatique (Poa), 28Ng/Ml, Antigène associé à l'adénocarcinome (Acaa), 5000Ng/Ml, Antigène Ca 19-9, 12000 Unités/Ml, Kératines épithéliales
Expression des antigènes
Antigène CA19-9, 12000 unités/mL, kératines épithéliales

06Manipulation et culture

Milieu de culture
IMDM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 25 mM HEPES, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 3.024 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820800a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
26 ans
Origine ethnique
Européen