Mine otse sisu juurde
CFPAC-1
Kude
Pankreas
Haigus
Tsüstiline fibroos, pankrease ductuse adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Maksa
Sünonüümid
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Dokumendid

CFPAC-1

Cell line · Toote number 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CFPAC-1 rakud, mis on saadud 26-aastaselt mehelt, kellel on tsüstiline fibroos ja ductuse adenokartsinoomi maksametastaasid, on bioloogiliste uuringute jaoks märkimisväärsete omadustega hüperdiploidne rakuliin. Nende adhesiivse kasvuomaduse ja tuumorigeense võime tõttu on nad praktiline mudel in vitro vähiuuringuteks. Rakuliini karyotüüp sisaldab 73 kromosoomi modaalset arvu koos mitmete translokatsioonidega ja, mis on oluline, kaks kuni kolm koopiat kromosoomi 7, kus asub tsüstilise fibroosi geen.

Need rakud ekspresseerivad vähiga seotud antigeene ja geene, nagu CA19-9, kartsinoembrüoantigeen (CEA), pankrease onkofetaalne antigeen (POA), adenokartsinoomiga seotud antigeen (ACAA) ja epiteliaalsed keratiinid, mis annavad ülevaate vähi bioloogiast. Tsüstilise fibroosi patoloogia seisukohalt näitavad CFPAC-1 rakud ainulaadset ioonitranspordi aktiivsust. Nad ei reageeri kloriidioonivoo puhul cAMP-agonistidele, adenüültsüklaasi stimulaatoritele ega fosfodiesteraasi inhibiitoritele, kuid näitavad suurenenud kloriidiväljavoolu vastuseks kaltsiumionofooridele.

CFPAC-1 rakud kannavad tavalist tsüstilise fibroosi mutatsiooni - kolme nukleotiidi deletsiooni, mis viib CFTR-geeni positsioonis 508 fenüülalaniini puudumiseni. Morfoloogiliselt on neil epiteeli tunnused koos apikaalsete mikrovillide, tihedate ühenduste ja lõhede ühendustega, mis on olulised epiteeli koostoimete uurimiseks nii vähi kui ka tsüstilise fibroosi puhul.

Kude
Pankreas
Haigus
Tsüstiline fibroos, pankrease ductuse adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Maksa
Sünonüümid
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
CFPAC-1 (Cytioni katalooginumber 305066)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Kartsinoembüooniline antigeen (Cea), 9Ng/Ml, Pankrease onkofetaalne antigeen (Poa), 28Ng/Ml, Adenokartsinoomiga seotud antigeen (Acaa), 5000Ng/Ml, Ca 19-9 antigeen, 12000 ühikut/Ml, epiteliaalsed keratiinid
Antigeeni ekspressioon
CA19-9 antigeen, 12000 ühikut/ml, epiteelikeraatiinid

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
IMDM, w: 4,5 g/L glükoos, w: 4 mM L-glutamiin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820800a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
26 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa