Gå til innholdet
CFPAC-1
Vev
Bukspyttkjertelen
Sykdom
Cystisk fibrose, adenokarsinom i bukspyttkjertelen
Metastaseområde
Lever
Synonymer
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Dokumenter

CFPAC-1

Cell line · Produktnummer 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

CFPAC-1-celler, som stammer fra en 26 år gammel mann med cystisk fibrose og levermetastaser av duktalt adenokarsinom, er en hyperdiploid cellelinje med bemerkelsesverdige egenskaper for biologisk forskning. Cellelinjens evne til å feste seg og vokse til svulster i nakne mus gjør den til en praktisk modell for in vitro-kreftstudier. Cellelinjens karyotype omfatter et modalt antall på 73 kromosomer med flere translokasjoner, og viktigst av alt, to til tre kopier av kromosom 7, der cystisk fibrose-genet er lokalisert.

Disse cellene uttrykker kreftrelaterte antigener og gener som CA19-9, karsinoembryonalt antigen (CEA), pankreatisk onkofetalt antigen (POA), adenokarsinomassosiert antigen (ACAA) og epiteliale keratiner, noe som gir innsikt i kreftbiologien. Når det gjelder cystisk fibrose-patologi, viser CFPAC-1-celler unike ionetransportaktiviteter. De reagerer ikke på cAMP-agonister, adenylsyklasestimulatorer eller fosfodiesterasehemmere for kloridionfluks, men viser økt kloridutstrømning som respons på kalsiumionoforer.

CFPAC-1-celler er bærere av den vanlige cystisk fibrose-mutasjonen - delesjon av tre nukleotider som fører til fravær av fenylalanin i posisjon 508 i CFTR-genet. Morfologisk sett har de epiteliale trekk med apikale mikrovilli, tight junctions og gap junctions, noe som er relevant for å studere epitelvevsinteraksjoner ved både kreft og cystisk fibrose.

Vev
Bukspyttkjertelen
Sykdom
Cystisk fibrose, adenokarsinom i bukspyttkjertelen
Metastaseområde
Lever
Synonymer
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Tumorinduserende
Ja

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CFPAC-1 (Cytion-katalognummer 305066)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Karsinoembryonalt antigen (Cea), 9Ng/Ml, pankreatisk onkofetalt antigen (Poa), 28Ng/Ml, adenokarsinomassosiert antigen (Acaa), 5000Ng/Ml, Ca 19-9 antigen, 12000 enheter/Ml, epiteliale keratiner
Antigenuttrykk
CA19-9 antigen, 12000 enheter/mL, epiteliale keratiner

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
IMDM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820800a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
26 år
Etnisitet
Europeisk