CFPAC-1

Le cellule CFPAC-1, derivate da un uomo di 26 anni con fibrosi cistica e metastasi epatiche di adenocarcinoma duttale, sono una linea cellulare iperdiploide con caratteristiche notevoli per la ricerca biologica. La loro proprietà di crescita aderente e la capacità tumorigenica in topi nudi le rendono un modello pratico per gli studi oncologici in vitro. Il cariotipo della linea cellulare comprende un numero modale di 73 cromosomi con diverse traslocazioni e, soprattutto, due o tre copie del cromosoma 7, dove si trova il gene della fibrosi cistica.

Queste cellule esprimono antigeni e geni correlati al cancro come il CA19-9, l'antigene carcinoembrionale (CEA), l'antigene oncofetale pancreatico (POA), l'antigene associato all'adenocarcinoma (ACAA) e le cheratine epiteliali, offrendo spunti di riflessione sulla biologia del cancro. Per quanto riguarda la patologia della fibrosi cistica, le cellule CFPAC-1 dimostrano attività di trasporto ionico uniche. Non rispondono agli agonisti del cAMP, agli stimolatori dell'adenilciclasi o agli inibitori della fosfodiesterasi per il flusso di ioni cloruro, ma mostrano un maggiore efflusso di cloruro in risposta agli ionofori del calcio.

Le cellule CFPAC-1 sono portatrici della comune mutazione della fibrosi cistica - delezione di tre nucleotidi che porta all'assenza di fenilalanina in posizione 508 nel gene CFTR. Morfologicamente, presentano caratteristiche epiteliali con microvilli apicali, giunzioni strette e gap junctions, rilevanti per lo studio delle interazioni tra tessuti epiteliali sia nel cancro che nella fibrosi cistica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia