Ga naar de inhoud
CFPAC-1
Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Cystische fibrose, pancreas ductaal adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Lever
Synoniemen
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Documenten

CFPAC-1

Cell line · Productnummer 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

CFPAC-1 cellen, afkomstig van een 26-jarige man met cystische fibrose en levermetastase van ductaal adenocarcinoom, zijn een hyperdiploïde cellijn met opmerkelijke eigenschappen voor biologisch onderzoek. Hun hechtingseigenschappen en tumorigene vermogen in naaktmuizen maken ze tot een praktisch model voor in vitro kankeronderzoek. Het karyotype van de cellijn bevat een modaal aantal van 73 chromosomen met verschillende translocaties, en belangrijk, twee tot drie kopieën van chromosoom 7, waar het cystische fibrose-gen zich bevindt.

Deze cellen brengen kankergerelateerde antigenen en genen tot expressie, zoals CA19-9, carcino-embryonaal antigeen (CEA), pancreas oncofetaal antigeen (POA), adenocarcinoom geassocieerd antigeen (ACAA) en epitheliale keratines, wat inzicht geeft in de biologie van kanker. Wat betreft de pathologie van cystische fibrose, vertonen CFPAC-1 cellen unieke ionentransportactiviteiten. Ze reageren niet op cAMP agonisten, adenyl cyclase stimulatoren of fosfodiësterase remmers voor chloride ion flux, maar vertonen een verhoogde chloride efflux in reactie op calcium ionoforen.

CFPAC-1 cellen dragen de veel voorkomende cystische fibrosemutatie - een deletie van drie nucleotiden die leidt tot de afwezigheid van fenylalanine op positie 508 in het CFTR-gen. Morfologisch vertonen ze epitheliale kenmerken met apicale microvilli, tight junctions en gap junctions, die relevant zijn voor het bestuderen van epitheliale weefselinteracties bij zowel kanker als cystische fibrose.

Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Cystische fibrose, pancreas ductaal adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Lever
Synoniemen
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Tumorverwekkend
Ja

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
CFPAC-1 (Cytion catalogusnummer 305066)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Carcinoembryonisch antigeen (Cea), 9Ng/Ml, pancreas oncofetaal antigeen (Poa), 28Ng/Ml, adenocarcinoom geassocieerd antigeen (Acaa), 5000Ng/Ml, Ca 19-9 antigeen, 12000 eenheden/Ml, epitheliale keratines
Antigeenexpressie
CA19-9 antigeen, 12000 eenheden/mL, epitheliale keratines

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
IMDM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820800a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
26 jaar
Etnische afkomst
Europese