İçeriğe atla
CFPAC-1
Doku
Pankreas
Hastalık
Kistik fibrozis, Pankreatik duktal adenokarsinom
Metastaz yeri
Karaciğer
Eş anlamlılar
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

CFPAC-1

Cell line · Ürün numarası 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Kistik fibrozis ve duktal adenokarsinomun karaciğer metastazı olan 26 yaşındaki bir erkekten elde edilen CFPAC-1 hücreleri, biyolojik araştırmalar için dikkate değer özelliklere sahip hiperdiploid bir hücre hattıdır. Çıplak farelerde yapışık büyüme özelliği ve tümörijenik kabiliyeti, onları in vitro kanser çalışmaları için pratik bir model haline getirmektedir. Hücre hattının karyotipi, çeşitli translokasyonlarla birlikte 73 kromozom ve daha da önemlisi, kistik fibroz geninin bulunduğu kromozom 7'nin iki ila üç kopyasını içerir.

Bu hücreler CA19-9, karsinoembriyonik antijen (CEA), pankreatik onkofetal antijen (POA), adenokarsinom ilişkili antijen (ACAA) ve epitelyal keratinler gibi kanserle ilişkili antijenleri ve genleri eksprese ederek kanser biyolojisine ilişkin bilgiler sunar. Kistik fibroz patolojisi açısından, CFPAC-1 hücreleri benzersiz iyon taşıma faaliyetleri gösterir. Klorür iyonu akışı için cAMP agonistlerine, adenil siklaz uyarıcılarına veya fosfodiesteraz inhibitörlerine yanıt vermezler, ancak kalsiyum iyonoforlarına yanıt olarak artan klorür akışı gösterirler.

CFPAC-1 hücreleri yaygın kistik fibroz mutasyonunu taşır - CFTR geninde 508. pozisyonda fenilalanin yokluğuna yol açan üç nükleotidin delesyonu. Morfolojik olarak, hem kanser hem de kistik fibrozda epitelyal doku etkileşimlerini incelemekle ilgili apikal mikrovilluslar, sıkı bağlantılar ve boşluk bağlantıları ile epitelyal özellikler sergilerler.

Doku
Pankreas
Hastalık
Kistik fibrozis, Pankreatik duktal adenokarsinom
Metastaz yeri
Karaciğer
Eş anlamlılar
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Tümör oluşturucu
Evet

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CFPAC-1 (Cytion katalog numarası 305066)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Karsinoembriyonik Antijen (Cea), 9Ng/Ml, Pankreatik Onkofetal Antijen (Poa), 28Ng/Ml, Adenokarsinom İlişkili Antijen (Acaa), 5000Ng/Ml, Ca 19-9 Antijeni, 12000 Ünite/Ml, Epitelyal Keratinler
Antijen ekspresyonu
CA19-9 antijeni, 12000 birim/mL, epitelyal keratinler

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
IMDM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Sodyum piruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820800a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
26 yıl
Etnik köken
Avrupa