Pāriet uz saturu
CFPAC-1
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Cistiskā fibroze, aizkuņģa dziedzera duktālā adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Aknas
Sinonīmi
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Dokumenti

CFPAC-1

Cell line · Preces numurs 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CFPAC-1 šūnas, kas iegūtas no 26 gadus veca vīrieša ar cistisko fibrozi un duktālās adenokarcinomas metastāzēm aknās, ir hiperdiploīda šūnu līnija ar ievērojamām bioloģisko pētījumu īpašībām. To adherences augšanas īpašība un audzēja veidošanas spēja nude pelēm padara tās par praktisku modeli in vitro vēža pētījumiem. Šūnu līnijas kariotipā ir 73 hromosomas ar vairākām translokācijām un, kas ir svarīgi, divas līdz trīs 7. hromosomas, kurā atrodas cistiskās fibrozes gēns, kopijas.

Šīs šūnas ekspresē ar vēzi saistītus antigēnus un gēnus, piemēram, CA19-9, karcīnoembrionālo antigēnu (CEA), aizkuņģa dziedzera onkofetālo antigēnu (POA), ar adenokarcinomu saistīto antigēnu (ACAA) un epitēlija keratīnus, kas ļauj gūt ieskatu vēža bioloģijā. Attiecībā uz cistiskās fibrozes patoloģiju CFPAC-1 šūnas uzrāda unikālas jonu transporta aktivitātes. Tās nereaģē uz cAMP agonistiem, adenilciklāzes stimulatoriem vai fosfodiesterāzes inhibitoriem hlorīdu jonu plūsmas nodrošināšanai, bet uzrāda pastiprinātu hlorīdu izplūdi, reaģējot uz kalcija jonoforiem.

CFPAC-1 šūnām ir izplatīta cistiskās fibrozes mutācija - trīs nukleotīdu delecija, kas izraisa fenilalanīna trūkumu CFTR gēna 508. pozīcijā. Morfoloģiski tām piemīt epitēlija iezīmes ar apikālajiem mikroviliem, ciešiem savienojumiem un spraugveida savienojumiem, kas ir svarīgi epitēlija audu mijiedarbības izpētei gan vēža, gan cistiskās fibrozes gadījumā.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Cistiskā fibroze, aizkuņģa dziedzera duktālā adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Aknas
Sinonīmi
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
CFPAC-1 (Cytion kataloga numurs 305066)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Karcinoembrionālais antigēns(Cea), 9Ng/Ml, aizkuņģa dziedzera onkofetālais antigēns(Poa), 28Ng/Ml, ar adenokarcinomu saistītais antigēns(Acaa), 5000Ng/Ml, Ca 19-9 antigēns, 12000 vienību/Ml, epitēlija keratīni
Antigēna ekspresija
CA19-9 antigēns, 12000 vienību/ml, epitēlija keratīni

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
IMDM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM nātrija piruvāta, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820800a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
26 gadi
Etniskā piederība
Eiropas