الانتقال إلى المحتوى
CFPAC-1
الأنسجة
البنكرياس
المرض
التليف الكيسي، سرطان القنوات البنكرياسية الغدي القنوي البنكرياسي
موقع الانتشار
الكبد
المرادفات
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

المستندات

CFPAC-1

Cell line · رقم المنتج 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تُعد خلايا CFPAC-1، المشتقة من ذكر يبلغ من العمر 26 عامًا مصاب بالتليف الكيسي والورم الخبيث في الكبد لسرطان الأقنية الغدي القنوي، خط خلوي مفرط الصبغيات مع ميزات ملحوظة للأبحاث البيولوجية. كما أن خاصية نموها الملتصقة وقدرتها على توليد الأورام في الفئران العارية تجعلها نموذجاً عملياً لدراسات السرطان في المختبر. يشتمل النمط النووي لخط الخلايا على عدد نموذجي يبلغ 73 كروموسومًا مع العديد من الانتقالات، والأهم من ذلك، نسختين إلى ثلاث نسخ من الكروموسوم 7، حيث يوجد جين التليف الكيسي.

وتعبّر هذه الخلايا عن مستضدات وجينات مرتبطة بالسرطان مثل CA19-9 ومستضد الكارسينو الغشائي (CEA) ومستضد البنكرياس الجنيني (POA) والمستضد المرتبط بالسرطان الغدي (ACAA) ومستضدات القرنية الظهارية، مما يوفر نظرة ثاقبة في بيولوجيا السرطان. فيما يتعلق بعلم أمراض التليف الكيسي، تُظهر خلايا CFPAC-1 أنشطة نقل أيونات فريدة من نوعها. فهي لا تستجيب لمنبهات cAMP أو محفزات الأدينيل سيكلاز أو مثبطات الفوسفوديستيراز لتدفق أيونات الكلوريد ولكنها تظهر زيادة في تدفق الكلوريد استجابةً لأيونات الكالسيوم.

تحمل خلايا CFPAC-1 طفرة التليف الكيسي الشائعة - حذف ثلاثة نيوكليوتيدات تؤدي إلى غياب الفينيل ألانين في الموضع 508 في جين CFTR. ومن الناحية الشكلية، تظهر هذه الخلايا سمات طلائية مع وجود حويصلات دقيقة قميّة وتقاطعات ضيقة وتقاطعات ثغرات، وهي ذات صلة بدراسة تفاعلات الأنسجة الظهارية في كل من السرطان والتليف الكيسي.

الأنسجة
البنكرياس
المرض
التليف الكيسي، سرطان القنوات البنكرياسية الغدي القنوي البنكرياسي
موقع الانتشار
الكبد
المرادفات
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم

04المعرّفات

المرجع
CFPAC-1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305066)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1119

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
المستضد الكارسينومبريوني (Cea)، 9 نانوغرام/ملليتر، المستضد البنكرياسي الأورام البنكرياسية (Poa)، 28 نانوغرام/ملليتر، المستضد المرتبط بالسرطان الغدي (Acaa)، 5000 نانوغرام/ملليتر، المستضد Ca 19-9، 12000 وحدة/ملليتر، القيراتين الظهاري
التعبير عن المستضد
مستضد CA19-9، 12000 وحدة/ملليتر، القرنيات الظهارية

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
IMDM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 ميلي مولار جلوتامين، ث: 25 ميلي مولار هيبيس (HEPES)، ث: 1.0 ميلي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 3.024 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820800a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
26 سنة
الأصل العرقي
أوروبي