Премини към съдържанието
CFPAC-1
Тъкан
Панкреас
Заболяване
Муковисцидоза, Панкреатичен дуктален аденокарцином
Място на метастазите
Черен дроб
Синоними
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Документи

CFPAC-1

Cell line · Номер на продукта 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките CFPAC-1, получени от 26-годишен мъж с муковисцидоза и чернодробни метастази на дуктален аденокарцином, са хипердиплоидна клетъчна линия със забележителни характеристики за биологични изследвания. Тяхното свойство за растеж чрез прилепване и туморогенната им способност в голи мишки ги превръщат в практичен модел за in vitro изследвания на рака. Кариотипът на клетъчната линия включва модален брой от 73 хромозоми с няколко транслокации и, което е важно, две до три копия на хромозома 7, където е разположен генът за муковисцидоза.

Тези клетки експресират антигени и гени, свързани с рака, като CA19-9, карциноембрионален антиген (CEA), панкреасен онкофетален антиген (POA), свързан с аденокарцинома антиген (ACAA) и епителни кератини, предлагайки поглед върху биологията на рака. По отношение на патологията на кистозната фиброза клетките CFPAC-1 демонстрират уникални дейности за пренос на йони. Те не реагират на агонисти на цАМФ, стимулатори на аденилциклазата или инхибитори на фосфодиестеразата за потока на хлоридните йони, но показват повишено изтичане на хлориди в отговор на калциеви йонофори.

Клетките CFPAC-1 са носители на често срещаната мутация при муковисцидоза - делеция на три нуклеотида, водеща до липса на фенилаланин в позиция 508 в гена CFTR. В морфологично отношение те проявяват епителни характеристики с апикални микровили, тесни връзки и gap junctions, които са от значение за изучаване на взаимодействията между епителните тъкани както при рак, така и при муковисцидоза.

Тъкан
Панкреас
Заболяване
Муковисцидоза, Панкреатичен дуктален аденокарцином
Място на метастазите
Черен дроб
Синоними
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Туморогенен
Да

04Идентификатори

Източник
CFPAC-1 (каталожен номер на Cytion 305066)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1119

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Карциноембрионален антиген (Cea), 9 Ng/Ml, панкреатичен онкофетален антиген (Poa), 28 Ng/Ml, аденокарцином асоцииран антиген (Acaa), 5000 Ng/Ml, Ca 19-9 антиген, 12000 единици/Ml, епителни кератини
Експресия на антигена
CA19-9 антиген, 12000 единици/ml, епителни кератини

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
IMDM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 3,024 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820800a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
26 години
Етническа принадлежност
Европейски