Pereiti prie turinio
CFPAC-1
Audinys
Kasa
Liga
Cistinė fibrozė, kasos latakų adenokarcinoma
Metastazių vieta
Kepenys
Sinonimai
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Dokumentai

CFPAC-1

Cell line · Prekės numeris 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

CFPAC-1 ląstelės, gautos iš 26 metų vyro, sergančio cistine fibroze ir kepenų metastazėmis į latakų adenokarcinomą, yra hiperdiploidinė ląstelių linija, pasižyminti išskirtinėmis biologinių tyrimų savybėmis. Dėl jų lipnumo augimo savybės ir gebėjimo augti nuogose pelėse jos yra praktiškas vėžio tyrimų in vitro modelis. Ląstelių linijos kariotipą sudaro 73 chromosomos su keliomis translokacijomis ir, svarbiausia, dvi ar trys 7 chromosomos, kurioje yra cistinės fibrozės genas, kopijos.

Šios ląstelės ekspresuoja su vėžiu susijusius antigenus ir genus, tokius kaip CA19-9, karcinoembrioninis antigenas (CEA), kasos onkofetalinis antigenas (POA), su adenokarcinoma susijęs antigenas (ACAA) ir epiteliniai keratinai, todėl galima įžvelgti vėžio biologiją. Kalbant apie cistinės fibrozės patologiją, CFPAC-1 ląstelės pasižymi unikaliu jonų pernešimo aktyvumu. Jos nereaguoja į cAMP agonistus, adenilciklazės stimuliatorius ar fosfodiesterazės inhibitorius chloridų jonų srauto atžvilgiu, tačiau, reaguodamos į kalcio jonoforus, pasižymi padidėjusiu chloridų nutekėjimu.

CFPAC-1 ląstelėms būdinga cistinės fibrozės mutacija - trijų nukleotidų delecija, dėl kurios CFTR geno 508 pozicijoje nėra fenilalanino. Morfologiškai joms būdingi epitelio bruožai su viršūniniais mikroelementais, sandariomis jungtimis ir tarpinėmis jungtimis, kurie yra svarbūs tiriant epitelio audinių sąveiką tiek vėžio, tiek cistinės fibrozės atvejais.

Audinys
Kasa
Liga
Cistinė fibrozė, kasos latakų adenokarcinoma
Metastazių vieta
Kepenys
Sinonimai
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis
Tumorogeninis
Taip

04Identifikatoriai

Nuoroda
CFPAC-1 (Cytion katalogo numeris 305066)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Karcinoembrioninis antigenas (Cea), 9Ng/Ml, kasos onkofetalinis antigenas (Poa), 28Ng/Ml, su adenokarcinoma susijęs antigenas (Acaa), 5000Ng/Ml, Ca 19-9 antigenas, 12000 vienetų/Ml, epitelio keratinai
Antigeno ekspresija
CA19-9 antigenas, 12000 vienetų/ml, epitelio keratinai

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
IMDM, w: 4,5 g/l gliukozės, w: 4 mM L-glutamino, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natrio piruvato, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820800a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
26 metai
Etninė priklausomybė
Europos