Preskoči na vsebino
CFPAC-1
Tkivo
Trebušna slinavka
Bolezen
Cistična fibroza, adenokarcinom trebušne slinavke
Mesto metastaze
Jetra
Sinonimi
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Dokumenti

CFPAC-1

Cell line · Številka izdelka 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice CFPAC-1, pridobljene od 26-letnega moškega s cistično fibrozo in metastazami duktalnega adenokarcinoma v jetrih, so hiperdiploidna celična linija z izjemnimi lastnostmi za biološke raziskave. Zaradi svoje adherenčne rasti in tumorigene sposobnosti v golih miših so praktičen model za študije raka in vitro. Kariotip celične linije vključuje modalno število 73 kromosomov z več translokacijami in, kar je pomembno, dve do tri kopije kromosoma 7, kjer se nahaja gen za cistično fibrozo.

Te celice izražajo z rakom povezane antigene in gene, kot so CA19-9, karcinoembrionalni antigen (CEA), pankreatični onkofetalni antigen (POA), z adenokarcinomom povezan antigen (ACAA) in epitelijski keratini, kar omogoča vpogled v biologijo raka. Kar zadeva patologijo cistične fibroze, celice CFPAC-1 izkazujejo edinstvene dejavnosti prenosa ionov. Ne odzivajo se na agoniste cAMP, stimulatorje adenil ciklaze ali inhibitorje fosfodiesteraze za pretok kloridnih ionov, vendar kažejo povečan odtok klorida kot odziv na kalcijeve ionofore.

Celice CFPAC-1 so nosilke običajne mutacije cistične fibroze - delecije treh nukleotidov, ki vodi do odsotnosti fenilalanina na položaju 508 v genu CFTR. Morfološko imajo epitelijske značilnosti z apikalnimi mikrovili, tesnimi vezmi in vrzelnimi vezmi, kar je pomembno za preučevanje interakcij epitelijskih tkiv pri raku in cistični fibrozi.

Tkivo
Trebušna slinavka
Bolezen
Cistična fibroza, adenokarcinom trebušne slinavke
Mesto metastaze
Jetra
Sinonimi
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Tumorigeničen
Da

04Identifikatorji

Navajanje vira
CFPAC-1 (kataloška številka Cytion 305066)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Karcinoembrionalni antigen (Cea), 9Ng/Ml, pankreatični onkofetalni antigen (Poa), 28Ng/Ml, z adenokarcinomom povezan antigen (Acaa), 5000Ng/Ml, antigen Ca 19-9, 12000 enot/Ml, epitelijski keratini
Ekspresija antigena
CA19-9 antigen, 12000 enot/ml, epitelijski keratini

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
IMDM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 3,024 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820800a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
26 let
Etnična pripadnost
Evropski