Prejsť na obsah
CFPAC-1
Tkanivo
Pankreas
Choroba
Cystická fibróza, adenokarcinóm pankreasu
Miesto metastáz
Pečeň
Synonymá
CFPac-1, CF PAC-1, CF-PAC1, CF-Pac1, CF Pac1, CFPAC1, CFPac1, CFPAC

Dokumenty

CFPAC-1

Cell line · Číslo výrobku 305066

CFPAC-1 cells, derived from a 26-year-old male with cystic fibrosis and liver metastasis of ductal adenocarcinoma, are a hyperdiploid cell line with notab...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky CFPAC-1, získané od 26-ročného muža s cystickou fibrózou a metastázami duktálneho adenokarcinómu pečene, sú hyperdiploidnou bunkovou líniou s pozoruhodnými vlastnosťami pre biologický výskum. Ich adherenčná rastová vlastnosť a schopnosť nádorového bujnenia na nahých myšiach z nich robia praktický model na štúdie rakoviny in vitro. Karyotyp bunkovej línie obsahuje modálny počet 73 chromozómov s niekoľkými translokáciami, a čo je dôležité, dve až tri kópie chromozómu 7, kde sa nachádza gén cystickej fibrózy.

Tieto bunky exprimujú antigény a gény súvisiace s rakovinou, ako napríklad CA19-9, karcinoembryonálny antigén (CEA), pankreatický onkofetálny antigén (POA), antigén spojený s adenokarcinómom (ACAA) a epiteliálne keratíny, čo ponúka pohľad na biológiu rakoviny. Pokiaľ ide o patológiu cystickej fibrózy, bunky CFPAC-1 vykazujú jedinečné aktivity v oblasti transportu iónov. Nereagujú na agonistov cAMP, stimulátory adenylcyklázy alebo inhibítory fosfodiesterázy pre tok chloridových iónov, ale vykazujú zvýšený výtok chloridov v reakcii na vápnikové ionofory.

Bunky CFPAC-1 nesú bežnú mutáciu cystickej fibrózy - deléciu troch nukleotidov vedúcu k absencii fenylalanínu na pozícii 508 v géne CFTR. Z morfologického hľadiska vykazujú epitelové znaky s apikálnymi mikroklky, tesnými spojmi a medzerovitými spojmi, ktoré sú dôležité na štúdium interakcií epitelových tkanív pri rakovine aj cystickej fibróze.

Tkanivo
Pankreas
Choroba
Cystická fibróza, adenokarcinóm pankreasu
Miesto metastáz
Pečeň
Synonymá
  • CFPac-1
  • CF PAC-1
  • CF-PAC1
  • CF-Pac1
  • CF Pac1
  • CFPAC1
  • CFPac1
  • CFPAC

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové
Tumorigenický
Áno

04Identifikátory

Citácia
CFPAC-1 (katalógové číslo spoločnosti Cytion 305066)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1119

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Karcinoembryonálny antigén (Cea), 9Ng/Ml, pankreatický onkofetálny antigén (Poa), 28Ng/Ml, adenokarcinómový antigén (Acaa), 5000Ng/Ml, antigén Ca 19-9, 12000 jednotiek/Ml, epitelové keratíny
Expresia antigénu
CA19-9 antigén, 12000 jednotiek/ml, epitelové keratíny

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
IMDM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 3,024 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820800a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
26 rokov
Etnická príslušnosť
Európska