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DI TNC1
Tissu
Cerveau, diencéphale
Maladie
Normal
Synonymes
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

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DI TNC1

Cell line · Référence du produit 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire DI TNC1 est un modèle d'astrocyte immortalisé dérivé d'astrocytes primaires de type 1 prélevés dans le diencéphale d'un rat nouveau-né. Les cellules ont été immortalisées à l'aide de l'antigène T moyen du polyomavirus, ce qui leur confère la capacité de proliférer indéfiniment tout en conservant plusieurs caractéristiques des astrocytes primaires. Les cellules DI TNC1 sont largement utilisées dans les études sur la neuroinflammation et la neuroprotection, en particulier pour explorer le métabolisme énergétique astrocytaire, la réponse au stress oxydatif et la régulation des voies inflammatoires. Ces cellules expriment des marqueurs astrocytaires clés, tels que la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP) et la protéine S100β, et sont impliquées dans des processus métaboliques, notamment le stockage du glycogène et la fourniture d'énergie aux neurones.

L'une des caractéristiques des astrocytes DI TNC1 est leur implication dans les études sur le métabolisme énergétique. La recherche a démontré que ces cellules répondent à divers neurotransmetteurs, tels que la noradrénaline et le peptide intestinal vasoactif (VIP), en subissant une glycogénolyse et en modulant les niveaux d'AMP cyclique (AMPc). En outre, il a été démontré que les cellules DI TNC1 utilisent le glucose et produisent du lactate, ce qui est essentiel pour soutenir les fonctions neuronales. Cependant, certaines réponses observées dans les astrocytes primaires, comme la glycolyse stimulée par le glutamate ou la resynthèse significative du glycogène à long terme, ne sont pas aussi robustes dans les cellules DI TNC1. Cela souligne l'utilité des cellules DI TNC1 pour disséquer des aspects spécifiques de la physiologie des astrocytes qui sont pertinents pour la dynamique énergétique dans le système nerveux central.

Un autre domaine d'étude important utilisant les cellules DI TNC1 concerne l'étude du stress oxydatif et des voies de signalisation inflammatoires. Par exemple, les cellules DI TNC1 ont été utilisées pour analyser la régulation du facteur nucléaire kappa-chaîne lumineuse-enhancer des cellules B activées (NF-κB) et les voies du facteur nucléaire lié au facteur érythroïde 2 (Nrf2). Des expériences menées avec des polyphénols botaniques comme la quercétine et des extraits de plantes comme l'Ashwagandha ont montré que ces composés peuvent moduler les voies NF-κB et Nrf2/ARE (élément de réponse antioxydant) dans les astrocytes DI TNC1. Plus précisément, la quercétine inhibe l'activité NF-κB induite par le lipopolysaccharide (LPS) et renforce les défenses antioxydantes médiées par Nrf2, ce qui illustre le potentiel de ces cellules pour le dépistage d'agents anti-inflammatoires et neuroprotecteurs.

Tissu
Cerveau, diencéphale
Maladie
Normal
Synonymes
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Classification

Organisme
Rat
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
Fibroblaste
Type de cellule
Astrocyte, type II
Tumorigène
Non, testé sur des souris immunodéprimées, mais formation de colonies en milieu semi-solide

04Identifiants

Référence
DI TNC1 (numéro de catalogue Cytion 305343)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Gènes exprimés : alpha 2 macroglobuline, transferrine
Virus
Transformant : virus simien 40 (SV40)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
Sprague Dawley
Âge du donneur
1 jour