Przejdź do treści
DI TNC1
Chusteczka
Mózg, międzymózgowie
Choroba
Normalny
Synonimy
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Dokumenty

DI TNC1

Cell line · Numer produktu 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa DI TNC1 jest unieśmiertelnionym modelem astrocytów pochodzącym z pierwotnych astrocytów typu 1 pobranych z międzymózgowia noworodka szczura. Komórki zostały unieśmiertelnione przy użyciu antygenu środkowego T poliomawirusa, co zapewniło im zdolność do proliferacji w nieskończoność przy jednoczesnym zachowaniu kilku cech pierwotnych astrocytów. Komórki DI TNC1 są szeroko stosowane w badaniach nad neurozapaleniem i neuroprotekcją, w szczególności do badania metabolizmu energetycznego astrocytów, odpowiedzi na stres oksydacyjny i regulacji szlaków zapalnych. Komórki te wyrażają kluczowe markery astrocytarne, takie jak kwaśne białko fibrylarne gleju (GFAP) i białko S100β, i są zaangażowane w procesy metaboliczne, w tym magazynowanie glikogenu i dostarczanie energii do neuronów.

Jedną z charakterystycznych cech astrocytów DI TNC1 jest ich zaangażowanie w badania metabolizmu energetycznego. Badania wykazały, że komórki te reagują na różne neuroprzekaźniki, takie jak noradrenalina i wazoaktywny peptyd jelitowy (VIP), ulegając glikogenolizie i modulując poziomy cyklicznego AMP (cAMP). Ponadto wykazano, że komórki DI TNC1 wykorzystują glukozę i wytwarzają mleczan, które są kluczowe dla wspierania funkcji neuronów. Jednak niektóre reakcje obserwowane w pierwotnych astrocytach, takie jak glikoliza stymulowana glutaminianem lub znaczna długoterminowa resynteza glikogenu, nie są tak silne w komórkach DI TNC1. Podkreśla to użyteczność komórek DI TNC1 w badaniu konkretnych aspektów fizjologii astrocytów, które są istotne dla dynamiki energetycznej w ośrodkowym układzie nerwowym.

Innym ważnym obszarem badań z wykorzystaniem komórek DI TNC1 jest badanie stresu oksydacyjnego i zapalnych szlaków sygnałowych. Na przykład, komórki DI TNC1 zostały wykorzystane do analizy regulacji czynnika jądrowego kappa-light-chain-enhancer aktywowanych komórek B (NF-κB) i czynnika jądrowego erytroidalnego 2-powiązanego z czynnikiem 2 (Nrf2). Eksperymenty z botanicznymi polifenolami, takimi jak kwercetyna i ekstrakty z roślin takich jak Ashwagandha, wykazały, że związki te mogą modulować szlaki NF-κB i Nrf2/ARE (element odpowiedzi antyoksydacyjnej) w astrocytach DI TNC1. W szczególności stwierdzono, że kwercetyna hamuje aktywność NF-κB indukowaną lipopolisacharydem (LPS) i wzmacnia obronę antyoksydacyjną za pośrednictwem Nrf2, ilustrując potencjał tych komórek do badań przesiewowych środków przeciwzapalnych i neuroprotekcyjnych.

Chusteczka
Mózg, międzymózgowie
Choroba
Normalny
Synonimy
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Fibroblast
Typ komórki
Astrocyt, typ II
Nowotworotwórczy
Nie, testowane na myszach z immunosupresją, ale tworzyły kolonie na podłożu półstałym

04Identyfikatory

Źródło
DI TNC1 (numer katalogowy Cytion 305343)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Wyrażane geny: alfa2 makroglobulina, transferyna
Wirusy
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
Sprague Dawley
Wiek dawcy
1 dzień