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DI TNC1
Gewebe
Gehirn, Zwischenhirn
Krankheit
Normal
Synonyme
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

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DI TNC1

Cell line · Artikelnummer 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die DI TNC1-Zelllinie ist ein immortalisiertes Astrozytenmodell, das von primären Typ-1-Astrozyten aus dem Zwischenhirn einer neugeborenen Ratte stammt. Die Zellen wurden mit Hilfe des mittleren T-Antigens des Polyomavirus immortalisiert, was ihnen die Fähigkeit verleiht, sich unbegrenzt zu vermehren und gleichzeitig mehrere Eigenschaften der primären Astrozyten zu erhalten. DI TNC1-Zellen werden häufig in Studien zu Neuroinflammation und Neuroprotektion verwendet, insbesondere zur Untersuchung des astrozytären Energiestoffwechsels, der Reaktion auf oxidativen Stress und der Regulierung von Entzündungsprozessen. Diese Zellen exprimieren wichtige astrozytäre Marker wie das glial fibrillary acidic protein (GFAP) und das S100β-Protein und sind an Stoffwechselprozessen beteiligt, einschließlich der Glykogenspeicherung und der Energieversorgung von Neuronen.

Eines der charakteristischen Merkmale der DI TNC1-Astrozyten ist ihre Beteiligung an Studien zum Energiestoffwechsel. Die Forschung hat gezeigt, dass diese Zellen auf verschiedene Neurotransmitter wie Noradrenalin und vasoaktives intestinales Peptid (VIP) reagieren, indem sie Glykogenolyse betreiben und den Gehalt an zyklischem AMP (cAMP) modulieren. Darüber hinaus wurde gezeigt, dass DI TNC1-Zellen Glukose verwerten und Laktat produzieren, was für die Unterstützung neuronaler Funktionen entscheidend ist. Bestimmte Reaktionen, die in primären Astrozyten zu beobachten sind, wie z. B. die durch Glutamat stimulierte Glykolyse oder eine signifikante Langzeit-Glykogen-Resynthese, sind in DI TNC1-Zellen jedoch nicht so robust. Dies unterstreicht den Nutzen von DI TNC1-Zellen bei der Untersuchung spezifischer Aspekte der Astrozytenphysiologie, die für die Energiedynamik im zentralen Nervensystem relevant sind.

Ein weiterer wichtiger Bereich für Studien mit DI TNC1-Zellen ist die Untersuchung von oxidativem Stress und Entzündungssignalwegen. Beispielsweise wurden DI TNC1-Zellen zur Analyse der Regulierung des Kernfaktors kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) und des Kernfaktors erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) verwendet. Experimente mit pflanzlichen Polyphenolen wie Quercetin und Extrakten aus Pflanzen wie Ashwagandha haben gezeigt, dass diese Verbindungen die NF-κB- und Nrf2/ARE-Signalwege (Antioxidant Response Element) in DI TNC1-Astrozyten modulieren können. Insbesondere wurde festgestellt, dass Quercetin die durch Lipopolysaccharid (LPS) ausgelöste NF-κB-Aktivität hemmt und die Nrf2-vermittelte antioxidative Abwehr stärkt, was das Potenzial dieser Zellen für das Screening von entzündungshemmenden und neuroprotektiven Wirkstoffen verdeutlicht.

Gewebe
Gehirn, Zwischenhirn
Krankheit
Normal
Synonyme
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Fibroblasten
Zelltyp
Astrozyt, Typ II
Tumorauslösend
Nein, getestet an immunsupprimierten Mäusen, bildete aber Kolonien in halbfestem Medium

04Bezeichner

Quellenangabe
DI TNC1 (Cytion Katalognummer 305343)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Ausgedrückte Gene: Alpha-2-Makroglobulin, Transferrin
Viren
Transformant: Simian-Virus 40 (SV40)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Sprague Dawley
Alter des Spenders
1 Tag