Siirry sisältöön
DI TNC1
Kudos
Aivot, välikarsina
Sairaus
Normaali
Synonyymit
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Asiakirjat

DI TNC1

Cell line · Tuotenumero 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

DI TNC1 -solulinja on kuolematon astrosyyttimalli, joka on johdettu vastasyntyneen rotan välikarsinasta otetuista primaarisista tyypin 1 astrosyyteistä. Solut immortalisoitiin käyttämällä polyomaviruksen keskimmäistä T-antigeenia, mikä antaa niille kyvyn lisääntyä loputtomiin säilyttäen samalla useita primaaristen astrosyyttien ominaisuuksia. DI TNC1 -soluja käytetään laajalti neuroinflammaatio- ja neuroprotektiotutkimuksissa, erityisesti astrosyyttien energia-aineenvaihdunnan, oksidatiivisen stressin vasteen ja tulehdusreittien säätelyn tutkimiseen. Nämä solut ilmentävät keskeisiä astrosyyttisiä merkkiaineita, kuten gliafibrillaarista happoproteiinia (GFAP) ja S100β-proteiinia, ja ne osallistuvat aineenvaihduntaprosesseihin, kuten glykogeenin varastointiin ja energian toimittamiseen neuroneille.

Yksi DI TNC1 -astrosyyttien ominaispiirteistä on niiden osallistuminen energia-aineenvaihdunnan tutkimuksiin. Tutkimukset ovat osoittaneet, että nämä solut reagoivat erilaisiin välittäjäaineisiin, kuten noradrenaliiniin ja vasoaktiiviseen suolistopeptidiin (VIP), glykogenolyysillä ja moduloimalla syklisen AMP:n (cAMP) tasoja. Lisäksi DI TNC1 -solujen on osoitettu hyödyntävän glukoosia ja tuottavan laktaattia, jotka ovat ratkaisevia hermoston toimintojen tukemisen kannalta. Tietyt primaarisissa astrosyyteissä havaitut vasteet, kuten glutamaatin stimuloima glykolyysi tai merkittävä pitkäaikainen glykogeenin resynteesi, eivät kuitenkaan ole yhtä voimakkaita DI TNC1 -soluissa. Tämä korostaa DI TNC1 -solujen hyödyllisyyttä astrosyyttien fysiologian erityispiirteiden tutkimisessa, joilla on merkitystä keskushermoston energiadynamiikan kannalta.

Toinen merkittävä DI TNC1 -soluja käyttävä tutkimusalue liittyy hapetusstressin ja tulehdussignaalien välityspolkujen tutkimiseen. DI TNC1 -soluja on esimerkiksi käytetty aktivoitujen B-solujen ydintekijän kappa-valoketjun vahvistajan (NF-κB) ja ydintekijän erytroidi 2:een liittyvän tekijän 2 (Nrf2) säätelyn analysointiin. Kokeet kasviperäisillä polyfenoleilla, kuten kversetiinillä, ja Ashwagandhan kaltaisista kasveista saaduilla uutteilla ovat osoittaneet, että nämä yhdisteet voivat moduloida NF-κB- ja Nrf2/ARE-reittejä (antioksidanttinen vaste-elementti) DI TNC1 -astrosyyteissä. Erityisesti kversetiinin on havaittu estävän lipopolysakkaridin (LPS) aiheuttamaa NF-κB-aktiivisuutta ja tehostavan Nrf2-välitteistä antioksidanttista puolustusta, mikä osoittaa näiden solujen potentiaalia tulehdusta ja hermoja suojaavien aineiden seulonnassa.

Kudos
Aivot, välikarsina
Sairaus
Normaali
Synonyymit
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit
Solutyyppi
Astrosyytti, tyyppi II
Kasvaimia aiheuttava
Ei, testattu immunosuppressoituneilla hiirillä, mutta muodosti pesäkkeitä puolikiinteässä väliaineessa

04Tunnisteet

Lähdeviite
DI TNC1 (Cytionin luettelonumero 305343)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Ilmaistut geenit: alfa-2-makroglobuliini, transferriini
Virukset
Transformantti: Simian virus 40 (SV40)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Sprague Dawley
Luovuttajan ikä
1 päivä