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DI TNC1
ティッシュ
脳、間脳
病気
ノーマル
同義語
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

DI TNC1

Cell line · 製品番号 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

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01概要

説明

DI TNC1細胞株は、新生児ラットの間脳から採取した初代1型アストロサイトに由来する不死化アストロサイトモデルである。この細胞は、ポリオーマウイルスのミドルT抗原を用いて不死化され、初代アストロサイトのいくつかの特徴を維持しながら、無期限に増殖する能力を付与された。DI TNC1細胞は、神経炎症と神経保護の研究、特にアストロサイトのエネルギー代謝、酸化ストレスへの応答、炎症経路の制御の研究に広く用いられている。これらの細胞は、グリア線維性酸性タンパク質(GFAP)やS100βタンパク質などの主要なアストロサイトマーカーを発現し、グリコーゲンの貯蔵やニューロンへのエネルギー供給を含む代謝過程に関与している。

DI TNC1アストロサイトの特徴の一つは、エネルギー代謝研究への関与である。これらの細胞は、ノルアドレナリンや血管作動性腸管ペプチド(VIP)などのさまざまな神経伝達物質に応答し、グリコーゲン分解を受け、サイクリックAMP(cAMP)レベルを調節することが、研究によって証明されている。さらに、DI TNC1細胞はグルコースを利用し、神経細胞の機能維持に重要な乳酸を産生することが示されている。しかしながら、グルタミン酸刺激による解糖や長期にわたるグリコーゲン再合成のような、初代アストロサイトで見られる特定の反応は、DI TNC1細胞ではそれほど強固ではない。このことは、中枢神経系におけるエネルギー動態に関連するアストロサイト生理学の特異的側面の解明に、DI TNC1細胞が有用であることを強調している。

DI TNC1細胞を用いたもう一つの重要な研究分野は、酸化ストレスと炎症シグナル伝達経路の研究である。例えば、DI TNC1細胞は、活性化B細胞の核内因子κ-軽鎖エンハンサー(NF-κB)と核内因子赤血球2関連因子2(Nrf2)経路の制御を解析するのに使われている。ケルセチンのような植物性ポリフェノールやアシュワガンダのような植物からの抽出物を用いた実験により、これらの化合物がDI TNC1アストロサイトのNF-κBおよびNrf2/ARE(抗酸化反応要素)経路を調節できることが示された。特にケルセチンは、リポ多糖(LPS)誘導性のNF-κB活性を阻害し、Nrf2を介する抗酸化防御を増強することが見出され、これらの細胞が抗炎症薬や神経保護薬のスクリーニングに利用できる可能性を示している。

ティッシュ
脳、間脳
病気
ノーマル
同義語
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02分類

生物
ネズミ
セックス
未指定
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
2

03特徴

形態学
線維芽細胞
細胞の種類
アストロサイトII型
腫瘍形成性
免疫抑制マウスで試験したが、半固形培地でコロニーを形成した。

04識別子

引用
DI TNC1(サイシオン カタログ番号 305343)
NCBI 納税者番号
10116
セロサウルス
CVCL_0247

05発現と感受性

タンパク質の発現
発現遺伝子:α2マクログロブリン、トランスフェリン
ウイルス
形質転換体:シミアンウイルス40(SV40)

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
スプレイグ・ドーリー
ドナーの年齢
1日