Gå til innholdet
DI TNC1
Vev
Hjerne, diencephalon
Sykdom
Normal
Synonymer
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Dokumenter

DI TNC1

Cell line · Produktnummer 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

DI TNC1-cellelinjen er en udødeliggjort astrocyttmodell avledet fra primære type 1-astrocytter fra diencephalon hos nyfødte rotter. Cellene ble udødeliggjort ved hjelp av polyomavirusets midtre T-antigen, noe som gir dem evnen til å formere seg på ubestemt tid, samtidig som de beholder flere av egenskapene til primære astrocytter. DI TNC1-celler er mye brukt i studier av nevroinflammasjon og nevrobeskyttelse, særlig for å undersøke astrocyttenes energimetabolisme, respons på oksidativt stress og regulering av inflammatoriske signalveier. Disse cellene uttrykker viktige astrocytiske markører, som glial fibrillary acidic protein (GFAP) og S100β-protein, og er involvert i metabolske prosesser, blant annet glykogenlagring og energitilførsel til nevroner.

Et av kjennetegnene ved DI TNC1-astrocytter er at de er involvert i studier av energimetabolismen. Forskning har vist at disse cellene reagerer på ulike nevrotransmittere, som noradrenalin og vasoaktivt intestinalt peptid (VIP), ved å gjennomgå glykogenolyse og modulere nivåene av syklisk AMP (cAMP). I tillegg har DI TNC1-celler vist seg å utnytte glukose og produsere laktat, noe som er avgjørende for å støtte nevronale funksjoner. Visse responser som er sett i primære astrocytter, som glutamatstimulert glykolyse eller betydelig langsiktig glykogenresyntese, er imidlertid ikke like robuste i DI TNC1-celler. Dette viser at DI TNC1-celler kan brukes til å dissekere spesifikke aspekter ved astrocyttenes fysiologi som er relevante for energidynamikken i sentralnervesystemet.

Et annet viktig studieområde ved bruk av DI TNC1-celler omfatter undersøkelser av oksidativt stress og inflammatoriske signalveier. DI TNC1-celler har for eksempel blitt brukt til å analysere reguleringen av NF-κB (nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells) og Nrf2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2). Eksperimenter med botaniske polyfenoler som quercetin og ekstrakter fra planter som Ashwagandha har vist at disse forbindelsene kan modulere NF-κB og Nrf2/ARE (antioksidantresponselementet) i DI TNC1-astrocytter. Spesielt har quercetin vist seg å hemme lipopolysakkarid (LPS)-indusert NF-κB-aktivitet og forsterke Nrf2-mediert antioksidantforsvar, noe som illustrerer potensialet disse cellene har for screening av antiinflammatoriske og nevrobeskyttende midler.

Vev
Hjerne, diencephalon
Sykdom
Normal
Synonymer
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Sex
Uspesifisert
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast
Celletype
Astrocytt, type II
Tumorinduserende
Nei, testet i immunsupprimerte mus, men dannet kolonier i halvfast medium

04Identifikatorer

Kildehenvisning
DI TNC1 (Cytion-katalognummer 305343)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Gener uttrykt: alfa-2-makroglobulin, transferrin
Virus
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
Sprague Dawley
Donorens alder
1 dag