الانتقال إلى المحتوى
DI TNC1
الأنسجة
المخ، الدماغ، الدماغ الدماغي
المرض
عادي
المرادفات
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

المستندات

DI TNC1

Cell line · رقم المنتج 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط الخلايا النجمية DI TNC1 هو نموذج لخلايا نجمية غير خالدة مشتقة من خلايا نجمية أولية من النوع الأول مأخوذة من الدماغ الدماغي لجرذ حديث الولادة. وقد تم تخليد الخلايا باستخدام مستضد تي متعدد الفيروسات المتعدد المستضدات الأوسط، مما يمنحها القدرة على التكاثر إلى أجل غير مسمى مع الحفاظ على العديد من خصائص الخلايا النجمية الأولية. تُستخدم خلايا DI TNC1 على نطاق واسع في دراسات الالتهاب العصبي والحماية العصبية، خاصةً لاستكشاف استقلاب الطاقة النجمية واستجابة الخلايا النجمية للإجهاد التأكسدي وتنظيم مسارات الالتهاب. تعبر هذه الخلايا عن علامات نجمية رئيسية، مثل البروتين الحمضي الليفي الليفي الدبقي (GFAP) وبروتين S100β، وتشارك في عمليات التمثيل الغذائي، بما في ذلك تخزين الجليكوجين وتوفير الطاقة للخلايا العصبية.

وتتمثل إحدى السمات المميزة للخلايا النجمية من النوع TNC1 في مشاركتها في دراسات استقلاب الطاقة. وقد أظهرت الأبحاث أن هذه الخلايا تستجيب لمختلف الناقلات العصبية، مثل النورأدرينالين والببتيد المعوي الوعائي النشط في الأوعية الدموية (VIP)، من خلال الخضوع لتحلل الجليكوجين وتعديل مستويات AMP الدوري (cAMP). بالإضافة إلى ذلك، فقد ثبت أن خلايا DI TNC1 تستخدم الجلوكوز وتنتج اللاكتات، والتي تعتبر ضرورية لدعم وظائف الخلايا العصبية. ومع ذلك، فإن بعض الاستجابات التي شوهدت في الخلايا النجمية الأولية، مثل تحلل الغلوتامات المحفز بالغلوتامات أو إعادة تركيب الجليكوجين على المدى الطويل، ليست قوية في خلايا DI TNC1. وهذا يسلط الضوء على فائدة خلايا DI TNC1 في تشريح جوانب محددة من فسيولوجيا الخلايا النجمية ذات الصلة بديناميكيات الطاقة في الجهاز العصبي المركزي.

هناك مجال آخر مهم للدراسة باستخدام خلايا DI TNC1 يتضمن دراسة الإجهاد التأكسدي ومسارات الإشارات الالتهابية. فعلى سبيل المثال، استُخدمت خلايا DI TNC1 لتحليل تنظيم مسارات العامل النووي كابا-سلسلة ضوء-مُحسِّن السلسلة الضوئية للخلايا البائية المنشطة (NF-κB) والعامل النووي 2 المرتبط بالعامل النووي 2 المرتبط بالحمراء 2 (Nrf2). أظهرت التجارب على البوليفينول النباتي مثل الكيرسيتين ومستخلصات نباتات مثل أشواغاندا أن هذه المركبات يمكنها تعديل مسارات العامل النووي NF-κB والعامل النووي 2/العامل النووي 2 المرتبط بالعامل النووي 2 (عنصر الاستجابة المضادة للأكسدة) في الخلايا النجمية DI TNC1. وعلى وجه التحديد، وُجد أن الكيرسيتين يثبط نشاط NF-κB الناجم عن عديد السكاريد الشحمي (LPS) ويعزز الدفاعات المضادة للأكسدة بوساطة Nrf2 بوساطة عنصر الاستجابة المضادة للأكسدة، مما يوضح إمكانية هذه الخلايا لفحص العوامل المضادة للالتهابات والعوامل المضادة للأعصاب.

الأنسجة
المخ، الدماغ، الدماغ الدماغي
المرض
عادي
المرادفات
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02التصنيف

كائن حي
الجرذ
الجنس
غير محدد
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة الليفية
نوع الخلية
الخلايا النجمية، النوع الثاني
مُسبِّب للأورام
لا، تم اختبارها في الفئران المثبطة للمناعة، ولكنها شكلت مستعمرات في وسط شبه صلب

04المعرّفات

المرجع
DI TNC1 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305343)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10116
سيلوصور
CVCL_0247

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
الجينات المعبر عنها: ألفا 2 ماكروغلوبولين، ترانسفيرين
الفيروسات
المتحول: فيروس سيميان 40 (SV40)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
سبرج داولي
عمر المتبرع
1 يوم واحد