
- Weefsel
- Hersenen, diencephalon
- Ziekte
- Normaal
- Synoniemen
- DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1
Documenten
DI TNC1
Cell line · Productnummer 305343
The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...
Maatwerk / Aanbevelingen
- DI TNC1Cell line€550.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
De DI TNC1 cellijn is een geïmmortaliseerd astrocytenmodel afgeleid van primaire type-1 astrocyten uit het diencephalon van een neonatale rat. De cellen werden geïmmortaliseerd met behulp van het polyomavirus midden T-antigeen, waardoor ze de mogelijkheid hebben om zich onbeperkt te vermenigvuldigen met behoud van verschillende kenmerken van primaire astrocyten. DI TNC1-cellen worden veel gebruikt in studies naar neuroinflammatie en neuroprotectie, met name voor het onderzoeken van het energiemetabolisme van astrocyten, de respons op oxidatieve stress en de regulatie van ontstekingsroutes. Deze cellen brengen belangrijke astrocytaire markers tot expressie, zoals gliaal fibrillair zuur proteïne (GFAP) en S100β proteïne, en zijn betrokken bij metabolische processen, waaronder glycogeenopslag en energielevering aan neuronen.
Een van de kenmerkende eigenschappen van DI TNC1 astrocyten is hun betrokkenheid bij studies naar energiemetabolisme. Onderzoek heeft aangetoond dat deze cellen reageren op verschillende neurotransmitters, zoals noradrenaline en vasoactief intestinaal peptide (VIP), door glycogenolyse te ondergaan en het cyclisch AMP (cAMP) niveau te moduleren. Daarnaast is aangetoond dat DI TNC1 cellen glucose gebruiken en lactaat produceren, wat cruciaal is voor de ondersteuning van neuronale functies. Bepaalde reacties in primaire astrocyten, zoals glutamaat-gestimuleerde glycolyse of significante glycogeen resynthese op lange termijn, zijn echter niet zo robuust in DI TNC1 cellen. Dit benadrukt het nut van DI TNC1 cellen bij het ontleden van specifieke aspecten van de astrocyt fysiologie die relevant zijn voor de energiedynamiek in het centrale zenuwstelsel.
Een ander belangrijk onderzoeksgebied met DI TNC1 cellen betreft het onderzoek naar oxidatieve stress en inflammatoire signaalwegen. DI TNC1 cellen zijn bijvoorbeeld gebruikt om de regulatie van de nucleaire factor kappa-licht-keten-enhancer van geactiveerde B-cellen (NF-κB) en de nucleaire factor erythroïde 2 gerelateerde factor 2 (Nrf2) pathways te analyseren. Experimenten met botanische polyfenolen zoals quercetine en extracten van planten zoals Ashwagandha hebben aangetoond dat deze stoffen de NF-κB en Nrf2/ARE (antioxidant response element) routes in DI TNC1 astrocyten kunnen moduleren. In het bijzonder bleek quercetine de lipopolysaccharide (LPS)-geïnduceerde NF-κB-activiteit te remmen en de Nrf2-gemedieerde antioxidantverdediging te versterken. Dit illustreert het potentieel van deze cellen voor het screenen van ontstekingsremmende en neuroprotectieve middelen.
- Weefsel
- Hersenen, diencephalon
- Ziekte
- Normaal
- Synoniemen
- DITNC1
- DI-TNC1
- DI TNC-1
02Classificatie
- Organisme
- Rat
- Seks
- Niet gespecificeerd
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 2
03Kenmerken
- Morfologie
- Fibroblast
- Celtype
- Astrocyt, type II
- Tumorverwekkend
- Nee, getest in immuunsuppressieve muizen, maar vormde wel kolonies in halfvast medium
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- DI TNC1 (Cytion catalogusnummer 305343)
- NCBI-belastingnummer
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0247
05Expressie en vatbaarheid
- Eiwit-expressie
- Tot expressie komende genen: alfa 2 macroglobuline, transferrine
- Virussen
- Transformant: Simian virus 40 (SV40)
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Soort / ondersoort
- Sprague Dawley
- Leeftijd van de donor
- 1 dag
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja