Ga naar de inhoud
DI TNC1
Weefsel
Hersenen, diencephalon
Ziekte
Normaal
Synoniemen
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Documenten

DI TNC1

Cell line · Productnummer 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De DI TNC1 cellijn is een geïmmortaliseerd astrocytenmodel afgeleid van primaire type-1 astrocyten uit het diencephalon van een neonatale rat. De cellen werden geïmmortaliseerd met behulp van het polyomavirus midden T-antigeen, waardoor ze de mogelijkheid hebben om zich onbeperkt te vermenigvuldigen met behoud van verschillende kenmerken van primaire astrocyten. DI TNC1-cellen worden veel gebruikt in studies naar neuroinflammatie en neuroprotectie, met name voor het onderzoeken van het energiemetabolisme van astrocyten, de respons op oxidatieve stress en de regulatie van ontstekingsroutes. Deze cellen brengen belangrijke astrocytaire markers tot expressie, zoals gliaal fibrillair zuur proteïne (GFAP) en S100β proteïne, en zijn betrokken bij metabolische processen, waaronder glycogeenopslag en energielevering aan neuronen.

Een van de kenmerkende eigenschappen van DI TNC1 astrocyten is hun betrokkenheid bij studies naar energiemetabolisme. Onderzoek heeft aangetoond dat deze cellen reageren op verschillende neurotransmitters, zoals noradrenaline en vasoactief intestinaal peptide (VIP), door glycogenolyse te ondergaan en het cyclisch AMP (cAMP) niveau te moduleren. Daarnaast is aangetoond dat DI TNC1 cellen glucose gebruiken en lactaat produceren, wat cruciaal is voor de ondersteuning van neuronale functies. Bepaalde reacties in primaire astrocyten, zoals glutamaat-gestimuleerde glycolyse of significante glycogeen resynthese op lange termijn, zijn echter niet zo robuust in DI TNC1 cellen. Dit benadrukt het nut van DI TNC1 cellen bij het ontleden van specifieke aspecten van de astrocyt fysiologie die relevant zijn voor de energiedynamiek in het centrale zenuwstelsel.

Een ander belangrijk onderzoeksgebied met DI TNC1 cellen betreft het onderzoek naar oxidatieve stress en inflammatoire signaalwegen. DI TNC1 cellen zijn bijvoorbeeld gebruikt om de regulatie van de nucleaire factor kappa-licht-keten-enhancer van geactiveerde B-cellen (NF-κB) en de nucleaire factor erythroïde 2 gerelateerde factor 2 (Nrf2) pathways te analyseren. Experimenten met botanische polyfenolen zoals quercetine en extracten van planten zoals Ashwagandha hebben aangetoond dat deze stoffen de NF-κB en Nrf2/ARE (antioxidant response element) routes in DI TNC1 astrocyten kunnen moduleren. In het bijzonder bleek quercetine de lipopolysaccharide (LPS)-geïnduceerde NF-κB-activiteit te remmen en de Nrf2-gemedieerde antioxidantverdediging te versterken. Dit illustreert het potentieel van deze cellen voor het screenen van ontstekingsremmende en neuroprotectieve middelen.

Weefsel
Hersenen, diencephalon
Ziekte
Normaal
Synoniemen
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Classificatie

Organisme
Rat
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast
Celtype
Astrocyt, type II
Tumorverwekkend
Nee, getest in immuunsuppressieve muizen, maar vormde wel kolonies in halfvast medium

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
DI TNC1 (Cytion catalogusnummer 305343)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Tot expressie komende genen: alfa 2 macroglobuline, transferrine
Virussen
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
Sprague Dawley
Leeftijd van de donor
1 dag