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DI TNC1
Pañuelo de papel
Cerebro, diencéfalo
Enfermedad
Normal
Sinónimos
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

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DI TNC1

Cell line · Número de producto 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

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01Información general

Descripción

La línea celular DI TNC1 es un modelo de astrocito inmortalizado derivado de astrocitos primarios de tipo 1 extraídos del diencéfalo de una rata neonatal. Las células se inmortalizaron utilizando el antígeno T medio del poliomavirus, lo que les confiere la capacidad de proliferar indefinidamente al tiempo que mantienen varias características de los astrocitos primarios. Las células DI TNC1 se utilizan ampliamente en estudios sobre neuroinflamación y neuroprotección, en particular para explorar el metabolismo energético astrocítico, la respuesta al estrés oxidativo y la regulación de las vías inflamatorias. Estas células expresan marcadores astrocíticos clave, como la proteína ácida fibrilar glial (GFAP) y la proteína S100β, y participan en procesos metabólicos, como el almacenamiento de glucógeno y el suministro de energía a las neuronas.

Una de las características distintivas de los astrocitos DI TNC1 es su participación en estudios sobre el metabolismo energético. Las investigaciones han demostrado que estas células responden a diversos neurotransmisores, como la noradrenalina y el péptido intestinal vasoactivo (VIP), mediante la glucogenólisis y la modulación de los niveles de AMP cíclico (AMPc). Además, se ha demostrado que las células DI TNC1 utilizan glucosa y producen lactato, que son cruciales para el mantenimiento de las funciones neuronales. Sin embargo, ciertas respuestas observadas en astrocitos primarios, como la glucólisis estimulada por glutamato o la resíntesis significativa de glucógeno a largo plazo, no son tan robustas en las células DI TNC1. Esto pone de relieve la utilidad de las células DI TNC1 para diseccionar aspectos específicos de la fisiología de los astrocitos que son relevantes para la dinámica energética del sistema nervioso central.

Otra importante área de estudio con células DI TNC1 es la investigación del estrés oxidativo y las vías de señalización inflamatoria. Por ejemplo, las células DI TNC1 se han utilizado para analizar la regulación de las vías del factor nuclear kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) y del factor nuclear eritroide 2-related factor 2 (Nrf2). Experimentos con polifenoles botánicos como la quercetina y extractos de plantas como la Ashwagandha han demostrado que estos compuestos pueden modular las vías NF-κB y Nrf2/ARE (elemento de respuesta antioxidante) en astrocitos DI TNC1. En concreto, se ha descubierto que la quercetina inhibe la actividad NF-κB inducida por lipopolisacáridos (LPS) y potencia las defensas antioxidantes mediadas por Nrf2, lo que ilustra el potencial de estas células para el cribado de agentes antiinflamatorios y neuroprotectores.

Pañuelo de papel
Cerebro, diencéfalo
Enfermedad
Normal
Sinónimos
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Clasificación

Organismo
Rata
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
Fibroblastos
Tipo de célula
Astrocito, tipo II
Tumorigénico
No, probado en ratones inmunodeprimidos, pero formó colonias en medio semisólido

04Identificadores

Referencia
DI TNC1 (número de catálogo 305343 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Genes expresados: alfa 2 macroglobulina, transferrina
Virus
Transformante: Virus simia 40 (SV40)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
Sprague Dawley
Edad del donante
1 día