Skip to content
DI TNC1
Tissue
สมอง, สมองส่วนกลาง
Disease
ปกติ
Synonyms
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Documents

DI TNC1

Cell line · Product number 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ DI TNC1 เป็นแบบจำลองเซลล์แอสโทรไซต์ที่คงสภาพความเป็นอมตะ ซึ่งได้มาจากแอสโทรไซต์ชนิดที่ 1 ต้นกำเนิดจากไดเอนเซฟาลอนของลูกหนูแรกเกิด เซลล์เหล่านี้ถูกทำให้คงสภาพความเป็นอมตะโดยใช้โปรตีน T-antigen ชนิดกลางของไวรัสโพลิโอมาไวรัส ซึ่งทำให้เซลล์สามารถแบ่งตัวได้อย่างไม่จำกัดในขณะที่ยังคงลักษณะหลายประการของแอสโทรไซต์ต้นกำเนิดเซลล์ DI TNC1 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาการอักเสบของระบบประสาทและการปกป้องระบบประสาท โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการสำรวจการเผาผลาญพลังงานของเซลล์แอสโตรไซต์ การตอบสนองต่อความเครียดออกซิเดชัน และการควบคุมเส้นทางอักเสบ เซลล์เหล่านี้แสดงตัวบ่งชี้สำคัญของเซลล์แอสโตรไซต์ เช่น โปรตีนกลียาไฟบริลลารีแอซิดิก (GFAP) และโปรตีน S100β และมีส่วนร่วมในกระบวนการเมตาบอลิซึม รวมถึงการเก็บสะสมไกลโคเจนและการจัดหาพลังงานให้กับเซลล์ประสาท

หนึ่งในลักษณะเด่นของเซลล์แอสโทรไซต์ชนิด DI TNC1 คือการมีส่วนร่วมในการศึกษาการเผาผลาญพลังงาน งานวิจัยได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์เหล่านี้ตอบสนองต่อสารสื่อประสาทต่างๆ เช่น นอร์อะดรีนาลีน และวาโซแอคทีฟ อินเทสตินอล เพปไทด์ (VIP) โดยการผ่านกระบวนการไกลโคเจนอลิซิส และปรับระดับไซคลิก AMP (cAMP) นอกจากนี้ เซลล์ DI TNC1 ยังแสดงให้เห็นว่าสามารถใช้น้ำตาลกลูโคสและผลิตแลคเตท ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญในการสนับสนุนการทำงานของเซลล์ประสาทอย่างไรก็ตาม การตอบสนองบางอย่างในแอสโตรไซต์ปฐมภูมิ เช่น การเกิดไกลโคไลซิสที่กระตุ้นด้วยกลูตาเมตหรือการสังเคราะห์ไกลโคเจนระยะยาวอย่างมีนัยสำคัญ ไม่ค่อยชัดเจนในเซลล์ DI TNC1 นี่แสดงให้เห็นถึงประโยชน์ของเซลล์ DI TNC1 ในการแยกแยะแง่มุมเฉพาะของสรีรวิทยาแอสโตรไซต์ที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงพลังงานในระบบประสาทส่วนกลาง

อีกด้านหนึ่งที่สำคัญของการศึกษาโดยใช้เซลล์ DI TNC1 คือการตรวจสอบความเครียดออกซิเดชันและเส้นทางการส่งสัญญาณการอักเสบ ตัวอย่างเช่น เซลล์ DI TNC1 ถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์การควบคุมของปัจจัยนิวเคลียร์ kappa-light-chain-enhancer ของเซลล์ B ที่ถูกกระตุ้น (NF-κB) และปัจจัยนิวเคลียร์ erythroid 2-related factor 2 (Nrf2)การทดลองกับโพลีฟีนอลจากพืช เช่น เควอซิทิน และสารสกัดจากพืช เช่น อชวังกัท (Ashwagandha) ได้แสดงให้เห็นว่าสารประกอบเหล่านี้สามารถปรับเปลี่ยนเส้นทางการส่งสัญญาณ NF-κB และ Nrf2/ARE (องค์ประกอบตอบสนองต่อการต้านอนุมูลอิสระ) ในเซลล์แอสโตรไซต์ชนิด DI TNC1 ได้โดยเฉพาะอย่างยิ่ง พบว่าเควอซิทินสามารถยับยั้งกิจกรรมของ NF-κB ที่ถูกกระตุ้นโดยไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ (LPS) และเสริมสร้างการป้องกันต้านอนุมูลอิสระผ่าน Nrf2 ซึ่งแสดงให้เห็นถึงศักยภาพของเซลล์เหล่านี้ในการคัดกรองสารต้านการอักเสบและสารปกป้องระบบประสาท

Tissue
สมอง, สมองส่วนกลาง
Disease
ปกติ
Synonyms
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Classification

Organism
Rat
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ไฟโบรบลาสต์
Cell type
แอสโตรไซต์ ชนิดที่ 2
Tumourigenic
ไม่, ทดสอบในหนูที่ถูกกดภูมิคุ้มกันแล้ว แต่สามารถสร้างโคโลนีในอาหารเลี้ยงเชื้อแบบกึ่งแข็งได้

04Identifiers

Citation
DI TNC1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305343)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Expression and susceptibility

Protein expression
ยีนที่แสดงออก: อัลฟา 2 แมคโกรโกลบูลิน, ทรานส์เฟอริน
Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสซิเมียน 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
สเปร็ก ดอว์ลีย์
Donor age
1 วัน