DI TNC1

A linhagem celular DI TNC1 é um modelo de astrócito imortalizado derivado de astrócitos primários do tipo 1, obtidos do diencéfalo de um rato recém-nascido. As células foram imortalizadas utilizando o antígeno T intermediário do poliomavírus, o que lhes conferiu a capacidade de proliferar indefinidamente, mantendo várias características dos astrócitos primários. As células DI TNC1 são amplamente utilizadas em estudos de neuroinflamação e neuroproteção, particularmente para explorar o metabolismo energético dos astrócitos, a resposta ao estresse oxidativo e a regulação das vias inflamatórias. Essas células expressam marcadores astrocíticos essenciais, como a proteína ácida fibrilar glial (GFAP) e a proteína S100β, e estão envolvidas em processos metabólicos, incluindo o armazenamento de glicogênio e o fornecimento de energia aos neurônios.

Uma das principais características dos astrócitos DI TNC1 é seu envolvimento em estudos de metabolismo energético. Pesquisas demonstraram que essas células respondem a vários neurotransmissores, como a noradrenalina e o peptídeo intestinal vasoativo (VIP), por meio da glicogenólise e da modulação dos níveis de AMP cíclico (cAMP). Além disso, demonstrou-se que as células DI TNC1 utilizam glicose e produzem lactato, o que é crucial para sustentar as funções neuronais. No entanto, certas respostas observadas em astrócitos primários, como a glicólise estimulada pelo glutamato ou a ressíntese significativa de glicogênio a longo prazo, não são tão robustas nas células DI TNC1. Isso destaca a utilidade das células DI TNC1 na análise de aspectos específicos da fisiologia dos astrócitos que são relevantes para a dinâmica energética no sistema nervoso central.

Outra área significativa de estudo utilizando células DI TNC1 envolve a investigação do estresse oxidativo e das vias de sinalização inflamatória. Por exemplo, as células DI TNC1 têm sido utilizadas para analisar a regulação das vias do fator nuclear kappa-cadeia leve-potenciador de células B ativadas (NF-κB) e do fator nuclear 2 relacionado ao eritroide 2 (Nrf2). Experimentos com polifenóis botânicos, como a quercetina, e extratos de plantas, como a ashwagandha, demonstraram que esses compostos podem modular as vias do NF-κB e do Nrf2/ARE (elemento de resposta antioxidante) nos astrócitos DI TNC1. Especificamente, verificou-se que a quercetina inibe a atividade do NF-κB induzida pelo lipopolissacarídeo (LPS) e potencializa as defesas antioxidantes mediadas pelo Nrf2, ilustrando o potencial dessas células para a triagem de agentes anti-inflamatórios e neuroprotetores.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.