DI TNC1
Cell line · Product number 305343
The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים DI TNC1 הוא מודל אסטרוציטים מהונדס, שמקורו באסטרוציטים מסוג 1 ראשוניים שנלקחו מהדיאנצפלון של חולדת יילוד. התאים הונדסו באמצעות אנטיגן T אמצעי של נגיף הפוליומה, מה שהקנה להם את היכולת להתרבות ללא הגבלה תוך שמירה על מספר מאפיינים של אסטרוציטים ראשוניים. תאי DI TNC1 נמצאים בשימוש נרחב במחקרים על דלקת עצבית והגנה עצבית, במיוחד לחקר חילוף החומרים האנרגטי של אסטרוציטים, התגובה ללחץ חמצוני והוויסות של מסלולי דלקת. תאים אלה מבטאים סמנים אסטרוציטיים מרכזיים, כגון חלבון חומצי פיברילרי גליאלי (GFAP) וחלבון S100β, והם מעורבים בתהליכים מטבוליים, כולל אחסון גליקוגן ואספקת אנרגיה לנוירונים.
אחת התכונות הבולטות של אסטרוציטים DI TNC1 היא מעורבותם במחקרים על חילוף החומרים האנרגטי. מחקרים הוכיחו שתאים אלה מגיבים למגוון נוירוטרנסמיטרים, כגון נוראדרנלין ופפטיד מעי וזו-אקטיבי (VIP), באמצעות גליקוגנוליזה וויסות רמות ה-cAMP (cyclic AMP). בנוסף, תאים DI TNC1 הוכחו כמשתמשים בגלוקוז ומייצרים לקטט, החיוניים לתמיכה בתפקודי הנוירונים. עם זאת, תגובות מסוימות הנצפות באסטרוציטים ראשוניים, כגון גליקוליזה המושרית על ידי גלוטמט או סינתזה מחודשת משמעותית של גליקוגן לטווח ארוך, אינן חזקות באותה מידה בתאי DI TNC1. הדבר מדגיש את התועלת של תאי DI TNC1 בניתוח היבטים ספציפיים של הפיזיולוגיה של האסטרוציטים הרלוונטיים לדינמיקת האנרגיה במערכת העצבים המרכזית.
תחום מחקר משמעותי נוסף המשתמש בתאי DI TNC1 כולל חקירת מסלולי איתות של לחץ חמצוני ודלקת. לדוגמה, תאי DI TNC1 שימשו לניתוח הוויסות של הגורם הגרעיני kappa-light-chain-enhancer של תאי B מופעלים (NF-κB) והמסלולים של הגורם הגרעיני erythroid 2-related factor 2 (Nrf2). ניסויים עם פוליפנולים בוטניים כמו קוורצטין ותמציות מצמחים כמו אשווגנדה הראו כי תרכובות אלה יכולות לווסת את מסלולי NF-κB ו-Nrf2/ARE (אלמנט תגובה נוגד חמצון) באסטרוציטים DI TNC1. בפרט, נמצא כי קוורצטין מעכב את פעילות NF-κB המושרית על ידי ליפופוליסכריד (LPS) ומחזק את ההגנה הנוגדת חמצון המתווכת על ידי Nrf2, מה שממחיש את הפוטנציאל של תאים אלה לסינון חומרים נוגדי דלקת ונוירו-מגנים.
- Tissue
- מוח, דיאנצפלון
- Disease
- רגיל
- Synonyms
- DITNC1
- DI-TNC1
- DI TNC-1
02Classification
- Organism
- Rat
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- פיברובלסט
- Cell type
- אסטרוציט, סוג II
- Tumourigenic
- לא, נבדק בעכברים עם דיכוי חיסוני, אך יצר מושבות במדיום חצי מוצק
04Identifiers
- Citation
- DI TNC1 (מספר קטלוגי Cytion 305343)
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0247
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- גנים שבאים לידי ביטוי: אלפא 2 מקרוגלובולין, טרנספרין
- Viruses
- טרנספורמנט: נגיף סימיאן 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- ספראג דוולי
- Donor age
- יום אחד
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
