Mine otse sisu juurde
DI TNC1
Kude
Aju, vahepealne aju
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Dokumendid

DI TNC1

Cell line · Toote number 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

DI TNC1 rakuliin on immortaliseeritud astrotsüütide mudel, mis on saadud vastsündinud roti vahepealsest ajukesest võetud primaarsetest 1. tüüpi astrotsüütidest. Rakud immortaliseeriti polüomaviiruse keskmise T-antigeeni abil, mis annab neile võime piiramatult paljuneda, säilitades samal ajal mitmeid esmaste astrotsüütide omadusi. DI TNC1 rakke kasutatakse laialdaselt neuroinflammatsiooni ja neuroprotektsiooni uuringutes, eelkõige astrotsüütide energia metabolismi, oksüdatiivsele stressile reageerimise ja põletikuradade reguleerimise uurimiseks. Need rakud ekspresseerivad põhilisi astrotsüütilisi markereid, nagu gliafibrillaarne happeline valk (GFAP) ja S100β valk, ning osalevad ainevahetusprotsessides, sealhulgas glükogeeni ladustamises ja neuronite energiaga varustamises.

Üks DI TNC1 astrotsüütide iseloomulikke tunnuseid on nende osalemine energia metabolismi uuringutes. Uuringud on näidanud, et need rakud reageerivad erinevatele neurotransmitteritele, nagu noradrenaliin ja vasoaktiivne soolepeptiid (VIP), glükogenolüüsi ja tsüklilise AMP (cAMP) taseme moduleerimisega. Lisaks on näidatud, et DI TNC1 rakud kasutavad glükoosi ja toodavad laktaati, mis on oluline neuronaalsete funktsioonide toetamiseks. Siiski ei ole teatud reaktsioonid, mida on täheldatud primaarsetes astrotsüütides, nagu glutamaadi stimuleeritud glükolüüs või märkimisväärne pikaajaline glükogeeni resüntees, DI TNC1 rakkudes nii jõulised. See rõhutab DI TNC1 rakkude kasulikkust astrotsüütide füsioloogia spetsiifiliste aspektide analüüsimisel, mis on olulised kesknärvisüsteemi energiadünaamika jaoks.

Teine oluline uurimisvaldkond, milles kasutatakse DI TNC1 rakke, hõlmab oksüdatiivse stressi ja põletikuliste signaaliradade uurimist. Näiteks on DI TNC1 rakke kasutatud aktiveeritud B-rakkude tuumafaktori kappa-valgusahela võimendaja (NF-κB) ja tuumafaktor erütroidi 2 seotud faktori 2 (Nrf2) regulatsiooni analüüsimiseks. Katsed taimsete polüfenoolidega, nagu kvertsetiin ja taimeekstraktid, näiteks Ashwagandha, on näidanud, et need ühendid võivad moduleerida NF-κB ja Nrf2/ARE (antioksüdantne reageerimiselement) radu DI TNC1 astrotsüütides. Konkreetselt on leitud, et kvertsetiin pärsib lipopolüsahhariidi (LPS) poolt indutseeritud NF-κB aktiivsust ja suurendab Nrf2-vahendatud antioksüdantide kaitset, mis näitab nende rakkude potentsiaali põletikuvastaste ja neuroprotektiivsete ainete skriininguks.

Kude
Aju, vahepealne aju
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide
Rakutüüp
Astrotsüüt, tüüp II
Tuumorigeenne
Ei, testitud immunosupresseeritud hiirtel, kuid moodustasid kolooniaid poolkindlal söötmel

04Tunnused

Viide
DI TNC1 (Cytioni katalooginumber 305343)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Ekspresseeritud geenid: alfa-2-makroglobuliin, transferriin
Viirused
Transformant: simian virus 40 (SV40)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Sprague Dawley
Doonori vanus
1 päev