Tartalomra ugrás
DI TNC1
Szövet
Agy, agyvelő
Betegség
Normál
Szinonimák
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Dokumentumok

DI TNC1

Cell line · Termékszám 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A DI TNC1 sejtvonal egy immortalizált asztrocita modell, amely az újszülött patkány diencephalonjából származó primer 1-es típusú asztrocitákból származik. A sejteket a poliomavírus középső T-antigénjének felhasználásával immortalizálták, ami biztosítja számukra a korlátlan szaporodás képességét, miközben megőrzi a primer asztrociták számos jellemzőjét. A DI TNC1 sejteket széles körben használják neuroinflammációs és neuroprotektív vizsgálatokban, különösen az asztrociták energiaanyagcseréjének, az oxidatív stresszre adott válaszreakciónak és a gyulladásos útvonalak szabályozásának feltárására. Ezek a sejtek olyan kulcsfontosságú asztrocita markereket expresszálnak, mint a gliafibrilláris savas fehérje (GFAP) és az S100β fehérje, és részt vesznek az anyagcsere-folyamatokban, beleértve a glikogénraktározást és a neuronok energiaellátását.

A DI TNC1 asztrociták egyik jellemzője az energiaanyagcsere-vizsgálatokban való részvételük. A kutatások kimutatták, hogy ezek a sejtek különböző neurotranszmitterekre, például noradrenalinra és vazoaktív bélpeptidre (VIP) glikogenolízissel és a ciklikus AMP (cAMP) szintjének modulálásával reagálnak. Továbbá a DI TNC1 sejtek bizonyítottan hasznosítják a glükózt és laktátot termelnek, amelyek létfontosságúak a neuronális funkciók támogatásához. Azonban bizonyos, az elsődleges asztrocitákban megfigyelhető válaszok, mint például a glutamát-stimulált glikolízis vagy a jelentős hosszú távú glikogén reszintézis, nem olyan robusztusak a DI TNC1 sejtekben. Ez rávilágít a DI TNC1 sejtek hasznosságára az asztrociták fiziológiájának olyan specifikus aspektusainak feltárásában, amelyek a központi idegrendszer energiadinamikája szempontjából relevánsak.

A DI TNC1 sejtek felhasználásával végzett vizsgálatok másik jelentős területe az oxidatív stressz és a gyulladásos jelátviteli útvonalak vizsgálata. A DI TNC1 sejteket például a nukleáris faktor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) és a nukleáris faktor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) útvonalak szabályozásának elemzésére használták. Az olyan növényi polifenolokkal, mint a kvercetin és az olyan növények kivonatával, mint az Ashwagandha, végzett kísérletek azt mutatták, hogy ezek a vegyületek képesek modulálni az NF-κB és az Nrf2/ARE (antioxidáns válaszelem) útvonalakat a DI TNC1 asztrocitákban. Konkrétan a kvercetin gátolja a lipopoliszacharid (LPS) által kiváltott NF-κB aktivitást és fokozza az Nrf2 által közvetített antioxidáns védelmet, ami szemlélteti e sejtek potenciálját a gyulladáscsökkentő és neuroprotektív szerek szűrésére.

Szövet
Agy, agyvelő
Betegség
Normál
Szinonimák
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblasztok
Sejttípus
Asztrocita, II-es típus
Daganatképző
Nem, immunszupprimált egereken tesztelték, de félszilárd táptalajon kolóniákat képeztek

04Azonosítók

Hivatkozás
DI TNC1 (Cytion katalógusszám: 305343)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Kifejeződő gének: alfa-2 makroglobulin, transzferrin
Vírusok
Transzformáns: Simian virus 40 (SV40)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
Sprague Dawley
Az adományozó életkora
1 nap