Preskoči na vsebino
DI TNC1
Tkivo
Možgani, diencefalon
Bolezen
Normalno
Sinonimi
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Dokumenti

DI TNC1

Cell line · Številka izdelka 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija DI TNC1 je imortaliziran model astrocitov, ki izhaja iz primarnih astrocitov tipa 1, odvzetih iz diencefalona novorojene podgane. Celice so bile imortalizirane z uporabo poliomavirusnega srednjega T-antigena, kar jim omogoča neomejeno razmnoževanje, hkrati pa ohranja več značilnosti primarnih astrocitov. Celice DI TNC1 se pogosto uporabljajo v študijah nevrovnetja in nevroprotekcije, zlasti za raziskovanje energijskega metabolizma astrocitov, odziva na oksidativni stres in regulacije vnetnih poti. Te celice izražajo ključne astrocitne označevalce, kot sta glialni fibrilarni kisli protein (GFAP) in protein S100β, ter sodelujejo pri presnovnih procesih, vključno s shranjevanjem glikogena in zagotavljanjem energije nevronom.

Ena od značilnih lastnosti astrocitov DI TNC1 je njihova vključenost v študije energijske presnove. Raziskave so pokazale, da se te celice odzivajo na različne nevrotransmiterje, kot sta noradrenalin in vazoaktivni intestinalni peptid (VIP), z glikogenolizo in modulacijo ravni cikličnega AMP (cAMP). Poleg tega je bilo dokazano, da celice DI TNC1 izkoriščajo glukozo in proizvajajo laktat, ki sta ključna za podporo nevronskih funkcij. Vendar pa nekateri odzivi, ki jih opazimo pri primarnih astrocitih, kot sta glutamatno stimulirana glikoliza ali pomembna dolgotrajna ponovna sinteza glikogena, v celicah DI TNC1 niso tako močni. To kaže na uporabnost celic DI TNC1 pri raziskovanju posebnih vidikov fiziologije astrocitov, ki so pomembni za dinamiko energije v osrednjem živčevju.

Drugo pomembno področje raziskav z uporabo celic DI TNC1 vključuje raziskovanje oksidativnega stresa in vnetnih signalnih poti. Celice DI TNC1 so bile na primer uporabljene za analizo regulacije poti jedrskega faktorja kappa-light-chain-enhancer aktiviranih celic B (NF-κB) in jedrskega faktorja erythroid 2-related factor 2 (Nrf2). Poskusi z rastlinskimi polifenoli, kot je kvercetin, in izvlečki iz rastlin, kot je ašvaganda, so pokazali, da lahko te spojine modulirajo poti NF-κB in Nrf2/ARE (element antioksidativnega odziva) v astrocitih DI TNC1. Zlasti je bilo ugotovljeno, da kvercetin zavira aktivnost NF-κB, ki jo povzroča lipopolisaharid (LPS), in povečuje antioksidativno obrambo, ki jo posreduje Nrf2, kar kaže na potencial teh celic za presejanje protivnetnih in nevroprotektivnih sredstev.

Tkivo
Možgani, diencefalon
Bolezen
Normalno
Sinonimi
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast
Vrsta celice
Astrociti, tip II
Tumorigeničen
Ne, testirano na imunosuprimiranih miših, vendar je tvorilo kolonije v poltrdnem gojišču

04Identifikatorji

Navajanje vira
DI TNC1 (kataloška številka Cytion 305343)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Izraženi geni: alfa 2 makroglobulin, transferin
Virusi
Transformant: Simijanski virus 40 (SV40)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
Sprague Dawley
Starost darovalca
1 dan