Gå direkte til indholdet
DI TNC1
Væv
Hjerne, diencephalon
Sygdom
Normal
Synonymer
DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1

Dokumenter

DI TNC1

Cell line · Varenummer 305343

The DI TNC1 cell line is an immortalized astrocyte model derived from primary type-1 astrocytes taken from the diencephalon of a neonatal rat. The cells w...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

DI TNC1-cellelinjen er en udødeliggjort astrocytmodel, der stammer fra primære type 1-astrocytter taget fra diencephalon hos en neonatal rotte. Cellerne blev udødeliggjort ved hjælp af polyomavirus middle T-antigen, hvilket giver dem evnen til at sprede sig på ubestemt tid, samtidig med at de bevarer flere af de primære astrocytters egenskaber. DI TNC1-celler bruges i vid udstrækning i undersøgelser af neuroinflammation og neurobeskyttelse, især til at udforske astrocytisk energimetabolisme, reaktion på oxidativ stress og regulering af inflammatoriske veje. Disse celler udtrykker vigtige astrocytiske markører, såsom glial fibrillary acidic protein (GFAP) og S100β-protein, og er involveret i metaboliske processer, herunder glykogenlagring og energiforsyning til neuroner.

Et af kendetegnene ved DI TNC1-astrocytter er deres involvering i studier af energimetabolisme. Forskning har vist, at disse celler reagerer på forskellige neurotransmittere, såsom noradrenalin og vasoaktivt tarmpeptid (VIP), ved at undergå glykogenolyse og modulere niveauet af cyklisk AMP (cAMP). Derudover har DI TNC1-celler vist sig at udnytte glukose og producere laktat, som er afgørende for at understøtte neuronale funktioner. Visse reaktioner, der ses i primære astrocytter, som glutamat-stimuleret glykolyse eller betydelig langsigtet glykogen-resyntese, er dog ikke så robuste i DI TNC1-celler. Dette fremhæver DI TNC1-cellers anvendelighed til at dissekere specifikke aspekter af astrocytfysiologi, der er relevante for energidynamikken i centralnervesystemet.

Et andet vigtigt undersøgelsesområde ved hjælp af DI TNC1-celler involverer undersøgelse af oxidativ stress og inflammatoriske signalveje. For eksempel er DI TNC1-celler blevet brugt til at analysere reguleringen af den nukleare faktor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) og den nukleare faktor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2). Eksperimenter med botaniske polyfenoler som quercetin og ekstrakter fra planter som Ashwagandha har vist, at disse forbindelser kan modulere NF-κB og Nrf2/ARE (antioxidant response element) i DI TNC1 astrocytter. Specifikt har quercetin vist sig at hæmme lipopolysaccharid (LPS)-induceret NF-κB-aktivitet og forbedre Nrf2-medieret antioxidantforsvar, hvilket illustrerer disse cellers potentiale for screening af antiinflammatoriske og neurobeskyttende midler.

Væv
Hjerne, diencephalon
Sygdom
Normal
Synonymer
  • DITNC1
  • DI-TNC1
  • DI TNC-1

02Klassificering

Organisme
Rotte
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This rat astrocyte cell line (DI TNC1) contains an SV40 early-region construct under GFAP promoter control delivered via plasmid transfection, enabling immortalization. The insert is stable in primary astrocyte-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast
Celletype
Astrocyt, type II
Tumorfremkaldende
Nej, testet i immunsupprimerede mus, men dannede kolonier i halvfast medium

04Identifikatorer

Kildehenvisning
DI TNC1 (Cytion katalognummer 305343)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0247

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Udtrykte gener: alfa-2-makroglobulin, transferrin
Vira
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
Sprague Dawley
Donorens alder
1 dag