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KLE
Tissu
Utérus, Endomètre
Maladie
Adénocarcinome de l'endomètre

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KLE

Cell line · Référence du produit 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire KLE est une lignée cellulaire adhérente dérivée de l'endomètre d'une patiente blanche atteinte d'un adénocarcinome. Cette lignée cellulaire a été établie à partir d'une patiente âgée de 64 jours et est devenue depuis un outil essentiel dans la recherche sur le cancer de l'endomètre. Les cellules KLE ont été déposées par GR Richardson et sont connues pour leurs propriétés tumorigènes, car elles forment des tumeurs en 21 jours avec une fréquence de 100 % lorsqu'elles sont inoculées par voie sous-cutanée à des souris nude. Ces tumeurs ne forment pas de glandes mais présentent des microvillosités, des complexes jonctionnels et des systèmes de canaux nucléolaires similaires à ceux que l'on trouve dans l'endomètre normal sous stimulation progestative.

Les cellules KLE expriment le groupe sanguin O et sont Rh positif, ce qui peut être pertinent pour des études spécifiques impliquant l'expression d'antigènes. La lignée cellulaire est couramment utilisée pour étudier la physiopathologie du carcinome endométrial, avec un intérêt particulier pour son statut de récepteur d'œstrogène négatif et de récepteur de progestérone positif. Ce profil de récepteurs rend les cellules KLE particulièrement adaptées à la recherche sur le rôle de la progestérone dans la progression du cancer de l'endomètre. Les études au microscope électronique des tumeurs dérivées des cellules KLE ont fourni des informations détaillées sur l'ultrastructure cellulaire, faisant de cette lignée cellulaire une ressource essentielle pour comprendre les aspects morphologiques de l'adénocarcinome de l'endomètre.

Tissu
Utérus, Endomètre
Maladie
Adénocarcinome de l'endomètre

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale
Tumorigène
Oui, des tumeurs se sont développées dans les 21 jours à une fréquence de 100 % (5/5) chez les souris nues inoculées par voie sous-cutanée avec 1×107 cellules.
Temps de doublement
114 heures

04Identifiants

Référence
KLE (numéro de catalogue Cytion 305051)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
Groupe sanguin O, Rh+

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
64 ans
Origine ethnique
Européen