Zum Inhalt springen
KLE
Gewebe
Gebärmutter, Gebärmutterschleimhaut
Krankheit
Adenokarzinom des Endometriums

Dokumente

KLE

Cell line · Artikelnummer 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00zzgl. MwSt. und Versandkosten
Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die KLE-Zelllinie ist eine adhärente Zelllinie, die aus dem Endometrium einer weißen Patientin mit Adenokarzinom stammt. Diese Zelllinie wurde aus einer 64 Tage alten Patientin gewonnen und hat sich seitdem zu einem wichtigen Instrument in der Endometriumkrebsforschung entwickelt. Die KLE-Zellen wurden von GR Richardson hinterlegt und sind für ihre tumorerzeugenden Eigenschaften bekannt, da sie bei subkutaner Inokulation in Nacktmäuse innerhalb von 21 Tagen mit 100%iger Häufigkeit Tumore bilden. Diese Tumore bilden keine Drüsen, weisen aber Mikrovilli, Junktionskomplexe und nukleolare Kanalsysteme auf, die denen ähneln, die im normalen Endometrium unter Gestagenstimulation zu finden sind.

KLE-Zellen exprimieren die Blutgruppe O und sind Rh-positiv, was für spezifische Studien mit Antigenexpression von Bedeutung sein kann. Die Zelllinie wird häufig zur Untersuchung der Pathophysiologie des Endometriumkarzinoms verwendet, wobei ihr Östrogenrezeptor-negativer und Progesteronrezeptor-positiver Status von besonderem Interesse ist. Aufgrund dieses Rezeptorprofils eignen sich KLE-Zellen hervorragend für die Erforschung der Rolle von Progesteron bei der Entstehung von Endometriumkrebs. Elektronenmikroskopische Untersuchungen von aus KLE-Zellen abgeleiteten Tumoren haben detaillierte Einblicke in die zelluläre Ultrastruktur geliefert, was diese Zelllinie zu einer wesentlichen Ressource für das Verständnis der morphologischen Aspekte des endometrialen Adenokarzinoms macht.

Gewebe
Gebärmutter, Gebärmutterschleimhaut
Krankheit
Adenokarzinom des Endometriums

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Tumorauslösend
Ja, bei Nacktmäusen, denen subkutan 1×107 Zellen injiziert wurden, entwickelten sich innerhalb von 21 Tagen mit einer Häufigkeit von 100 % (5/5) Tumore.
Verdopplungszeit
114 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
KLE (Cytion Katalognummer 305051)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Blutgruppe O, Rh+

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
64 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch